2018 Fiscal Year Research-status Report
生殖補助医療および母体環境要因による高次脳機能への影響の解明とリスク評価系の構築
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18K10058
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
遠藤 整 東海大学, 医学部, 講師 (10550551)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大和田 賢 東海大学, 医学部, 助教 (40756409)
住吉 秀明 東海大学, 医学部, 講師 (60343357)
阿部 幸一郎 東海大学, 医学部, 准教授 (90294123)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | THAラット / 高学習能 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、受精卵の取り扱いに関する技術と方法論の確立を目的として、雌雄のWistarラットまたはTHA ラット同士を交配させ、2 細胞期胚の採取を行った。一般的に、ラットの性周期は4－5日のサイクルで訪れるとされ、THAラットの性周期も他の系統と変わらないことが分かった。一方で、Wistarラットの性周期に個体差が見られたことから、飼育環境などの違いといった環境変化が性周期の個体差につながることが示唆された。THAラットは、学習行動試験の有無による交配率や採卵数に大きな影響が認められなかったことから、従来の飼育環境と行動試験であれば実験結果に大きな影響を及ぼす要因ではないことが分かった。採取したTHAラットの胚を一定期間液体窒素中で保存後、Jcl-Wistar, およびTHAラットを母体とし移植したところ、個体復元率に大きな影響は認められなかった。また、胚保存の保存液や低温保存などの保管環境要因は、出生率に関して大きな影響はなかった。学習成績の異なる母胎を用いて、高学習能を確認したTHA ラット由来の受精卵を移植し、母体側の学習レベルが子宮内環境を介して次世代の学習行動にどのような影響を与えるについて予備的検討を行った。母体の学習能力の違いがTHAラットの表現型に影響を与える結果を得たため、母体側の個体差による影響もあるため、個体数を解析し検討を重ねていきたい。今後は、同じWistarであっても異なるブリーダーや異なる系統を用いた時の個体復元率なども確認することが必要である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
当初の計画通り、Wistar, THAから2細胞期胚を取得し個体復元させることは実行できたものの、実験に必要な受精卵の取得数はまだまだ少なく、今後も継続して行う必要がある。また、Wistarラットの性周期に大きな個体差が認められた時があり、飼育環境によるものなのか、学習行動試験によるストレスによるものか、など慎重に見極める必要がある。一方で、個体復元により、THAラットの系統保存ならびにバイオリソースの可能性が見出された。しかしながら、当該飼育環境外でバイオリソースとして提供するためには、どの系統が最も望ましいのかなどの基礎的知見をさらに積み重ねる必要がある。
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| Strategy for Future Research Activity |
胚移植の実験に用いるためには、動物の一般飼育に加え、多数の交配による胚の取得が必要となる。これからも、鋭意継続して取り組む必要がある。さらに、胚を移植するレシピエント、偽妊娠させるための精管結紮ラットの作成、また帝王切開による出産となった場合の里親の準備、などについてスケジュール管理に気をつけながら実施する。子宮内環境を介した次世代影響が認められた際に、遺伝子発現の網羅的解析、タンパク発現、代謝産物の測定などを行う。同時に、THAラットが高学習能である理由や、どのようなメカニズムで次世代にその表現型を伝達しているかなどについて考察をしていきたい。
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| Causes of Carryover |
本年度は、少額の差額が生じたものの計画通りに使用できたと考える。差額は、来年度多く実施する予定である代謝産物の測定に充当する。
引き続き、実験動物の維持管理や研究遂行のため、一般的な実験試薬、各種解析に関連した一般消耗品を購入し、引き続き生化学的解析と行動学的試験を中心に検討していく。また、遺伝子発現などを含めた分子生物学的な解析や、メタボローム解析などの費用に充当する予定である。
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Research Products
(3 results)
