2019 Fiscal Year Annual Research Report
PD-L1 as target for the development of a new oncolytic virus
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18K15274
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
BUSTOS Itzel 名古屋大学, 国際機構(医), 特任講師 (60788777)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | PD-L1 / oncolytic virus / 免疫チェックポイント阻害剤 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、PD-L1高発現腫瘍への指向性を獲得した新たな腫瘍溶解性ウイルスHF10の開発を目的とする。具体的には、ウイルス表面の糖たんぱく質（glycoprotein B；gB）に抗PD-L1抗体の一本鎖抗体（single chain antibody；scFv）を結合させることで、腫瘍表面のPD-L1を特異的に認識し、腫瘍に感染、破壊するウイルスを作製する。
HF10ゲノムのgB遺伝子に抗PD-L1 scFv遺伝子を挿入することを計画した。抗ヒトPD-L1抗体の軽鎖可変領域（VL）と重鎖可変領域（VH）の遺伝子を人工合成し、この抗PD-L1 scFv遺伝子カセットの両端を各500塩基ずつgB遺伝子と同じ塩基配列で挟んだ抗PD-L1 scFv遺伝子導入用プラスミドベクターの構築を完了した。このベクターと共にHF10ゲノムDNAをVero細胞にトランスフェクションし、相同遺伝子組み換えによりgBに抗PD-L1 scFvを発現するHF10（HF10αPD-L1）を作製することを試みた。その過程で相同組み換えの効率の低さが問題となり、CRISPR/Cas9ゲノム編集技術を用いることで相同組換え効率を向上させることができたが、目的とするHF10αPD-L1の構築には至っていない。
HF10と抗PD-L1抗体とのマウス扁平上皮がん細胞SCCⅦ皮下腫瘍モデルマウスにおける併用療法の検討を行った。その結果、HF10と抗PD-L1抗体併用群は相乗的な抗腫瘍効果を示した。腫瘍への免疫細胞の浸潤について検討した結果、HF10ならびに併用群でT細胞、マクロファージ、NK細胞、樹状細胞の浸潤が高率に認められ、これら免疫細胞の腫瘍への浸潤が併用効果の増強に関与することが考えられる。この結果はHF10αPD-L1の強い抗腫瘍効果を期待させる。
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