2020 Fiscal Year Annual Research Report
A novel strategy on inactivation of animal RNA viruses by RNA editing system
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18K19264
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
堀本 泰介 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (00222282)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
村上 晋 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 准教授 (10636757)
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| Project Period (FY) |
2018-06-29 – 2021-03-31
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| Keywords | ウイルス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、新奇の革新的RNA編集テクノロジーであるCRISPR/FnCas9およびCRISPR/LwaCas13aシステムを用いたウイルスゲノムの不活化戦略により、動物のウイルス感染症の制御、特に鳥インフルエンザなどこれまでその制御が困難とされる動物RNAウイルス感染症に焦点を絞り、それらの革新的な制御法の確立を目指す。本来、DNAを標的とするゲノム編集システムであるが、最近、新しい種類のCasである特にFnCas9やLwaCas13aが、DNAのみならずRNAを認識してそれを切断・不活化することが報告された。本研究はその知見をRNAウイルスゲノムの不活化、ウイルスの増殖抑制に応用することを試みるものである。特に、インフルエンザウイルスの増殖抑制にRNAゲノム編集システムを初めて応用する。RISPR/CasはPAM配列非依存的にRNAを切断するので、HA亜型に関係なく全てのインフルエンザウイルスをユニバーサルに制御できる可能性がある。
本年度も昨年度に引き続き、インフルエンザウイルスの特異配列を認識できるRNA-targeting guide RNA（rgRNA）を発現するプラスミドを複数構築し、LwaCas13aを発現するベクターと同時に培養細胞に導入し、インフルエンザウイルスの増殖が抑制できるかを評価した。一部、ウイルス増殖を抑制するコンストラクトを選択したが、その抑制効果は弱く有意ではなかった。細胞核内で増殖するインフルエンザウイルスRNAに対する切断効果は現在の方法では不十分であると推測され、その効果が高まるような何らかの改変が必要であると考えられた。
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Research Products
(1 results)
