2008 Fiscal Year Annual Research Report
Int6-sIRNAによる正常血管誘導の解析と臨床応用
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19590327
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research |
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Principal Investigator |
陳 リー Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (30425681)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
芝崎 太 (財)東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 副参事研究員 (90300954)
戸井 雅和 (財)東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (10207516)
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| Keywords | 血管新生 / siRNA / 低酸素反応性因子 / 癌抑制因子 / 虚血 / RNA干渉 / 遺伝子導入 / 動物モデル |
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| Research Abstract |
これまでに酵母のTwo Hybrid系を用いて、低酸素反応性因子HIFに関して新規因子の結合因子の同定と解析を行ってきた。この中で、HIF2に特異的に結合し、HIF1とは異なった蛋白分解機序を示す因子
Int6/eIF3eを同定した(Chen et al JBC2007)。Int6はマウス乳ガン発症ウイルスがゲノムにIntegrationされる際の6番目の一であることから命名されており、腫瘍抑制因子と認識されている。これまでの解析では、Int6はHon Hippel Lindau遺伝子産物pVHLとは異なった機序でHIF2を特異的に分解し、さらにはHIF2によるInt6のプロモーター制御をも介したNegative Feedback機序に重要な役割を演じていることが判明した。さらにInt6に特異的なsiRNAをマウスの皮下に発現させたところ、非常に強力に、正常動脈・静脈を誘導した。このことから、Int6はHIF2を介した血管新生のマスタースイッチの一つであることが明らかになった。本申請では、これらの結果を基に、正常血管の新生機序に関してさらに詳しい解析を進めるとともに、KOマウスを作製し解析を進めることを目的とした。(1)KOマウスの作製において、Int6は本来翻訳調節因子としての役割を持ち、KOにより致死的な影響が考えられたため、新潟大学との共同研究にて、conditional KOマウス作製のためのベクターを構築し、マウス胚細胞への導入を行い、ポジティブ細胞を選別している。本過程が終わり次第、KOマウス作製のための本格的な実験を始める予定である。(2)Int6が調飾する正常血管新生は、皮膚へのsiRNA-Int6の導入にて明確になったが、その生理学的な意味の解明が十分でないため、ラット脳卒中モデル、心筋梗塞モデルに導入したところ、予備的な実験にて、著明な改善傾向が認められた。また皮膚損傷モデルへの導入にて、1日目より明かな治癒改善傾向が認められ、さらに血管の新生、および治癒過程における各種増殖因子、血管新生因子の分泌が証明された。
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[Presentation] Novel Function of Int6/HIF2α Pathway in Physiological Angiogenesis2008
Author(s)
F., Shibasaki, L., Chen, K., Uchida, A., Endler, S., Horiguchi, Y., Suzuki, M., Toi
Organizer
KSMBMB
Place of Presentation
Seoul, Korea
Year and Date
2008-10-30
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