2007 Fiscal Year Annual Research Report
mRNAイメージングによる白血病治療後の微少残存生細胞の同定法と網羅的な特性解析
Project/Area Number |
19590552
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Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
Principal Investigator |
竹下 明裕 Hamamatsu University School of Medicine, 医学部, 准教授 (00242769)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前川 真人 浜松医科大学, 医学部, 教授 (20190291)
竹下 香 (新庄 香) 浜松医科大学, 医学部附属病院, 医員 (30397393)
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Keywords | 白血病細胞 / Wt-1 / mRNA / 生細胞 |
Research Abstract |
特定の白血病細胞の分画の検出と分離を施行するため,細胞内のmRNAの染色を試みた。QUAL/FRET(quenched autoligating/fluorescence resonance energy transfer)法を改良し,蛍光probeの導入技術や反応時間の調整など多方面の改良を施行した。培養細胞では,生細胞率の低下を最小限に,probe導入率60%を可能とした。白血病患者由来検体を使用し,標的分子(RNA)をwt-1とし,白血病細胞の同定と分離を生細胞の状態で行うことを試みた。作成されたprobeの細胞膜の透過性を一時的に高めるためStreptlysin O(SLO)を使用した。SLOの至適濃度の決定に関しては細胞や試薬の状態などによる再現性の低下を防止するため,probe導入前にSLOの処理濃度の最適化実験を行い,flow cytometryにて検討した。培養細胞においてSLOの添加により細胞内のPIの蛍光は一様に増加した。FITC-dextranの取り込みはSLOの濃度の増加とともに増加した。しかし正常のリンパ球に関してはFITC-dextranの細胞内への取り込みはされにくく,改善の余地が認められた。またリンパ球自身にも個体差も認められた。今後はPIに染色されず,かつFITC-Dextranの取り込み量が最大となる条件設定をして,FRET probeの導入を行う予定である。
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Research Products
(9 results)
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[Journal Article] Pharmacokinetics of arsenic species in Japanese patients with relapsed or refractoryacute promyelocytic leukemia treated with arsenic trioxide2007
Author(s)
Fujisawa S, Ohno R, Shigeno K, Sahara N, Nakamura S, Naito K, Kobayashi M, Shinjo K, Takeshita A, Suzuki Y, Hashimoto H, Kinoshita K, Shimoya M, Kaise T, Ohnishi K.
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Journal Title
Cancer Chemother Pharmacol 59(4)
Pages: 485-493
Peer Reviewed
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[Journal Article] A randomized study with or without intensified maintenance chemotherapy in patients with acute promyelocytic leukemia who have become negative for PML-RARa transcript after consolidation therapy:The Japan Adult Leukemia Study Group(JALSG)APL97 study2007
Author(s)
Asou N, KIshimoto Y, Kiyoi H, Okada M, Kawai Y, Tsuzuki M, Horikawa K, Matsuda M, Shinagawa K, Ohtake S, Nishimura M, Takahashi M, Yagasaki F, Takeshita A, Kimura Y, Iwanaga M, Naoe T, Ohno R
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Journal Title
Blood 110(1)
Pages: 59-66
Peer Reviewed
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[Journal Article] Phase I Trial of FLAGM with High Doses of Cytosine Arabinoside for Relapsed, Refractory Acute Myeloid Leukemia:Study of the Japan Adult Leukemia Study Group (JALSG)2007
Author(s)
Miyawaki S, Kawai Y, Takeslvta A, Komatsu N, Usui N, Arai Y, Ishida F, Morii T, Kano Y, Ogura M, Doki N, Ohno R
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Journal Title
Int J Hematol 86
Pages: 343-347
Peer Reviewed
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[Journal Article] Clinical Significance of P-Glycoprotein in Acute Leukemia and a Strategy to Overcome Drug Resistance2007
Author(s)
Motoji T, Motomura S, Wang Y, .Tsuji K, Takanashi M, Slvozaki H, Mlyawaki S, Asou N, Takeshita A, Saburi Y, Ohno R, Mizoguchi H
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Journal Title
Frontiers in Cancer Res
Pages: 123-151
Peer Reviewed
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[Presentation] Cell cycle features and quantitative alteration of target molecules of malignant B cells treated with CMC544 alone or in combination with rituximab2007
Author(s)
Yamakage N, Takeshita A, Shinjo K, Ono T, Hiranol, Okinaka K, Nakamura S, Shigeno K, Maekawa M, Ohnishi K, Ohno R
Organizer
American Society of Hematology
Place of Presentation
アトランタ(米国)
Year and Date
2007-12-09
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[Presentation] Reduced effect of CMC544 on P-glycoprotein positive malignant B cells and its restoration by multidrug resistance modifiers2007
Author(s)
Takeshita A, Shinjo K, Yamakage N Ono T, Hiranol, Okinaka K, Matsui H, Nakamura S, Shigeno K, Maekawa M, Ohnishi K, Sugimoto Y, Ohno R
Organizer
American Society of Hematology
Place of Presentation
アトランタ(米国)
Year and Date
2007-12-09