2009 Fiscal Year Annual Research Report
脳カルボキシペプチダーゼB特異的結合蛋白の機能解析と認知症病態診断学的意義の解明
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19591027
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| Research Institution | Himeji Dokkyo University |
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Principal Investigator |
松本 明 Himeji Dokkyo University, 薬学部, 客員教授 (80181759)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松山 正剛 姫路獨協大学, 薬学部, 教授 (80243319)
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| Keywords | アルツマイマー病 / 軽度認知機能障害 / カルボキシペプチダーゼB / 立体構造認識 / モノクロナル抗体 / ベータアミロイド / CPB結合蛋白 / 結合ポケット |
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| Research Abstract |
1-1 HBCPBのCPB-BP結合部位(binding pocket)のin silico構造解析
平成20年度解析結果から、HBCPBとその特異的結合蛋白であるCPB-BPの作用機作の解析基盤研究であるが、両蛋白の1次構造を基盤として、抗体を用いるエピトープマッピングから解析を進めたところ、充分な特異性と感受性を併せ持つモノクロナル抗体が複数(6クローン)得られ、クローン毎にCPB-BPとの結合能の制御の解析を行った。結合阻害活性の解析から、特異性、感受性とは別に立体構造認識の差異に基づくと思われるグループ分けができ、今後さらに結合ポケットの立体構造解析を進め、創薬ターゲット解析の視点からも新たなプロジェクトで研究を推進したい。
1-2ヒト血清中CPB-BPおよびその近縁蛋白の探索と解析
多検体についてのハイスループット解析を可能にするため、表層プラズモン解析装置を質量分析器と組み合わせ、CPB-BPおよびその関連分子の同定解析を行った。即ちCPBのC端エピトープ分子に対応したオリゴペプチドをリガンド分子として、精製(アルブミン、免疫グロブリンの抗体アフィニティカラムによる除去)したヒト血清検体を解析した。免疫沈降法で得られた分子が同様に同定された他、その候補分子との相互作用が確認されている新たな分子が同定された。上記項目の解析結果との関連性も含め、創薬ターゲット解析の視点からも新たなプロジェクトで研究を推進したい。
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