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2021 Fiscal Year Annual Research Report

再生医療を革新的に効率化する機能性バイオ界面の創製

Research Project

Project/Area Number 19H02447
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

長瀬 健一  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 准教授 (10439838)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 綾野 絵理  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 研究員 (10424102)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Keywords温度応答性高分子 / 機能性界面 / バイオ界面 / 細胞分離 / 細胞組織
Outline of Annual Research Achievements

本研究は、再生医療に用いる細胞組織を作製するための機能性バイオインターフェイスの開発を目的としている。
令和三年度は、温度応答性高分子であるポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)(PNIPAAm)に細胞認識ペプチドを導入したバイオインターフェイスによる細胞分離の機能開発および細胞組織を作製する研究を推進した。
下層にペプチド結合部位としてpoly(2-hydroxyethyl methacrylate-co-propargyl acrylate) (poly(HEMA- co -PgA))、上層に温度応答性部位としてpoly(NIPAAm-co-HEMA)を有するブロックコポリマーをガラス基板に修飾した。この高分子に血管内皮細胞選択的な接着活性を示すArg-Glu-Asp-Val (REDV)ペプチドを導入した。作製したガラス基板をペトリディッシュに固定化し、モデル細胞として血管を構成するヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)、ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)、大動脈平滑筋細胞(AoSMC)を37℃で播種したところ、HUVECのみが接着した。さらに温度を20℃に下げることで接着したHUVECを回収することができた。この特性を利用して、温度変化だけでHUVECの分離を達成することができた。
また、PNIPAAm修飾基板を用いた間葉系幹細胞組織の作製に着手している。細胞播種密度やタンパク質吸着量を適切に制御することで効率的に細胞組織を作製することができた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当該年度に予定していた細胞認識因子を温度応答性高分子に導入した高分子ブラシ界面を構築することができた。さらに、間葉系幹細胞組織作製の条件検討にも着手することができた。これらの理由より当初の計画どおり順調に進捗しているといえる。

Strategy for Future Research Activity

令和四年度は、温度応答性高分子を用いた機能性バイオインターフェイスの設計を行なう。標的細胞を特異的に接着させるペプチド、荷電性官能基を温度応答性高分子に導入した機能性バイオインターフェイスを作製し、細胞分離の精度を向上させる。さらに、高機能化した間葉系幹細胞組織の作製を可能にする機能性バイオインターフェイスの開発にも着手する。

  • Research Products

    (55 results)

All 2022 2021

All Journal Article (9 results) (of which Peer Reviewed: 9 results,  Open Access: 5 results) Presentation (46 results) (of which Int'l Joint Research: 8 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Viral vector purification with thermoresponsive-anionic mixed polymer brush modified beads-packed column2022

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Kitazawa Sakiko、Kogure Toshihiko、Yamada Sota、Katayama Kazuhiro、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Separation and Purification Technology

      Volume: 286 Pages: 120445~120445

    • DOI

      10.1016/j.seppur.2022.120445

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Two-dimensional temperature-responsive chromatography using a poly(N-isopropylacrylamide) brush-modified stationary phase for effective therapeutic drug monitoring2022

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Inoue So、Inoue Masakazu、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 12 Pages: 2653

    • DOI

      10.1038/s41598-022-06638-1

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Temperature-responsive mixed-mode column for the modulation of multiple interactions2022

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Matsumoto Kosuke、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 12 Pages: 4434

    • DOI

      10.1038/s41598-022-08475-8

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Effective Separation for New Therapeutic Modalities Utilizing Temperature-responsive Chromatography2021

    • Author(s)
      Maekawa Yutaro、Ayano Eri、Nagase Kenichi、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Analytical Sciences

      Volume: 37 Pages: 651~660

    • DOI

      10.2116/analsci.20SCR09

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effect of pore diameter on the elution behavior of analytes from thermoresponsive polymer grafted beads packed columns2021

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Umemoto Yuta、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 11 Pages: 9976

    • DOI

      10.1038/s41598-021-89165-9

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Temperature-responsive spin column for sample preparation using an all-aqueous eluent2021

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Ishizawa Yuta、Inoue Masakazu、Kokubun Matsurika、Yamada Sota、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Analytica Chimica Acta

      Volume: 1179 Pages: 338806~338806

    • DOI

      10.1016/j.aca.2021.338806

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Thermoresponsive interfaces obtained using poly(N-isopropylacrylamide)-based copolymer for bioseparation and tissue engineering applications2021

    • Author(s)
      Nagase Kenichi
    • Journal Title

      Advances in Colloid and Interface Science

      Volume: 295 Pages: 102487~102487

    • DOI

      10.1016/j.cis.2021.102487

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Thermally-modulated cell separation columns using a thermoresponsive block copolymer brush as a packing material for the purification of mesenchymal stem cells2021

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Edatsune Goro、Nagata Yuki、Matsuda Junnosuke、Ichikawa Daiju、Yamada Sota、Hattori Yutaka、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Biomaterials Science

      Volume: 9 Pages: 7054~7064

    • DOI

      10.1039/D1BM00708D

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Temperature responsive chromatography for therapeutic drug monitoring with an aqueous mobile phase2021

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Nishiyama Teruno、Inoue Masakazu、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 11 Pages: 23508

    • DOI

      10.1038/s41598-021-02998-2

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 肝細胞認識高分子と温度応答性高分子による肝細胞分離法の開発2021

    • Author(s)
      小島直人, 長瀬健一, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子
    • Organizer
      第81回分析化学討論会
  • [Presentation] 細胞移植効率化を目的とした細胞増殖因子徐放ナノ粒子の開発2021

    • Author(s)
      永岡真凜, 中野雄斗, 山田創太, 鵜頭理恵, 長瀬健一, 金澤秀子
    • Organizer
      第81回分析化学討論会
  • [Presentation] 温度応答性スピンカラムを用いた血清試料の除タンパク法の検討2021

    • Author(s)
      井上正和, 石澤佑太, 長瀬健一, 金澤秀子
    • Organizer
      第81回分析化学討論会
  • [Presentation] 幹細胞精製を目的とした温度応答性細胞分離カラムの開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • Organizer
      第81回分析化学討論会
  • [Presentation] 抗がん剤送達の効率化のための温度・pH 応答性高分子ミセルの作製2021

    • Author(s)
      相原佳真, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [Presentation] 温度応答性高分子を用いたアミノ酸トランスポーター標的リポソームの開発2021

    • Author(s)
      有村花音, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [Presentation] 幹細胞治療への応用を目的とした細胞分離カラムの開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • Organizer
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [Presentation] 温度に応答したアルギニン密度制御による高分子ミセルの細胞内送達2021

    • Author(s)
      山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [Presentation] Development of temperature-responsive anion-exchange chromatography for effective purification of oligonucleotides2021

    • Author(s)
      Kaichi Yamazaki, Yutaro Maekawa, Hideko Kanazawa, Kenichi Nagase
    • Organizer
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Effective temperature-modulated cell separation using polymer brush with cell affinity peptides2021

    • Author(s)
      Ruka Shimane, Masaki Shimura, Sota Yamada, Hideko Kanazawa, Kenichi Nagase
    • Organizer
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Temperature responsive cell separation chromatography for purification of mesenchymal stem cell2021

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Goro Edatsune, Sota Yamada, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Temperature-modulated sample preparation using thermoresponsive spin column2021

    • Author(s)
      Masakazu Inoue, Yuta Ishizawa, Hideko Kanazawa, Kenichi Nagase
    • Organizer
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 温度制御型肝細胞分離システムの開発2021

    • Author(s)
      小島直人, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第33回バイオメディカル分析科学シンポジウム (BMAS2021 Kyoto)
  • [Presentation] 温度制御により幹細胞を精製する細胞分離カラムの開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • Organizer
      第33回バイオメディカル分析科学シンポジウム (BMAS2021 Kyoto)
  • [Presentation] 刺激応答性高分子を用いた温度制御型核酸精製法の開発2021

    • Author(s)
      山崎開智, 前川祐太朗, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第33回バイオメディカル分析科学シンポジウム (BMAS2021 Kyoto)
  • [Presentation] 温度応答性-カチオン性ブロック共重合体による幹細胞分離法の開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • Organizer
      第70回高分子討論会
  • [Presentation] ラベルフリー細胞分離を実現する温度応答性細胞分離カラムの開発2021

    • Author(s)
      岡田明莉, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [Presentation] 温度応答性クロマトグラフィーによる簡便な血中薬物濃度測定法の開発2021

    • Author(s)
      髙木光, 西山輝乃, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [Presentation] 温度応答性高分子とイオン性高分子を用いたミックスモードカラム作製2021

    • Author(s)
      松本光祐, 渡邊真梨亜, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [Presentation] 大山純子, 寺内麻緒莉, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一2021

    • Author(s)
      化粧品への応用を目的としたリポソーム製剤の開発と機能性評価
    • Organizer
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [Presentation] 医療現場における血清試料の安全な除タンパクを目指した温度応答性スピンカラムの作製2021

    • Author(s)
      井上正和, 石澤佑太, 長瀬健一, 金澤秀子
    • Organizer
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [Presentation] がん治療を目的としたリガンド結合型温度応答性リポソームの開発2021

    • Author(s)
      有村花音, 藤條惠, 松浦みなみ, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [Presentation] 外部温度とpHに応答する抗がん剤デリバリーミセルの開発2021

    • Author(s)
      相原佳真, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [Presentation] 温度応答性高分子とアフィニティリガンドを用いたエクソソーム精製法の開発2021

    • Author(s)
      山崎開智, 前川祐太朗, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [Presentation] 細胞移植効率化のための血管新生因子徐放ナノ粒子の開発2021

    • Author(s)
      永岡真凜, 中野雄斗, 山田創太, 鵜頭理恵, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      LIFE2020-2021
  • [Presentation] 細胞接着性ペプチドリガンドと生体適合性高分子を用いた温度制御型細胞分離法の開発2021

    • Author(s)
      島根瑠霞, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      日本分析化学会第70年会
  • [Presentation] エクソソーム分離のための温度制御型アフィニティ精製法の開発2021

    • Author(s)
      山崎開智, 前川祐太朗, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      日本分析化学会第70年会
  • [Presentation] 簡便・安全な血清薬物試料の除タンパクを可能にする温度応答性スピンカラムの開発2021

    • Author(s)
      井上正和, 石澤佑太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      日本分析化学会第70年会
  • [Presentation] 機能性界面を用いたバイオ医薬品・治療用細胞の革新的分離精製法の開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一
    • Organizer
      第5回バイオインダストリー奨励賞講演会
    • Invited
  • [Presentation] 血清試料の安全な除タンパクを可能にする温度応答性スピンカラムの作製2021

    • Author(s)
      井上正和, 石澤佑太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [Presentation] 温度応答性肝細胞分離カラムの開発2021

    • Author(s)
      松田潤之介, 稲永大夢, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [Presentation] 温度制御型ウイルスベクター精製カラムの開発2021

    • Author(s)
      小暮利彦, 北澤 早紀子, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [Presentation] 温度制御型幹細胞クロマトグラフィーの開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一, 枝常吾郎, 金澤秀子
    • Organizer
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [Presentation] 細胞シート積層技術によるヒト骨格筋組織の作製と収縮力測定による機能評価2021

    • Author(s)
      高橋宏信, 若山暖乃, 長瀬健一, 清水達也
    • Organizer
      第43回日本バイオマテリアル学会大会
  • [Presentation] 細胞認識ペプチドを用いた温度制御型細胞分離法の開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一, 志村昌紀, 島根瑠霞, 金澤 秀子
    • Organizer
      第43回日本バイオマテリアル学会大会
  • [Presentation] Cell Separation Column using Thermoresponsive Block Copolymer Brush Modified Silica Bead as Packing Materials2021

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Goro Edatsune, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      8th Asian Biomaterials Congress, (8th ABMC)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Thermoresponsive ionic copolymer brushes for temperature modulated cell separations2021

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Naho Uchikawa, Ayumu Ohta, Tadashi Hirotani, Aya Mizutani Akimoto, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      The International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2021 (PacifiChem2021)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Temperature-modulated cell separation column using thermoresponsive cationic copolymer modified beads2021

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Daimu Inanaga, Aya Mizutani Akimoto, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      The International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2021 (PacifiChem2021)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Temperature responsive mixed mode chromatography for effective separation of ionic biomolecules2021

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Sakiko Kitazawa, Maria Watanabe, Fumihiko Zen, Sota Yamada, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      The International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2021 (PacifiChem2021)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 温度応答型アデノ随伴ウイルスベクター精製カラムの開発2021

    • Author(s)
      小暮利彦, 北澤 早紀子, 金澤秀子, 長瀬健一
    • Organizer
      ライフサポート学会 第31回フロンティア講演会
  • [Presentation] 間葉系幹細胞のラベルフリー分離を実現する細胞分離カラムの開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一, 枝常吾郎, 金澤秀子
    • Organizer
      第21回日本再生医療学会総会
  • [Presentation] 創薬研究への応用を目指した細胞シート積層技術によるヒト骨格筋組織モデルの作製2021

    • Author(s)
      高橋宏信, 若山暖乃, 長瀬健一, 清水達也
    • Organizer
      第21回日本再生医療学会総会
  • [Presentation] 温度応答性ウイルスベクター精製カラムの開発2021

    • Author(s)
      小暮利彦、北澤早紀子、片山和浩、金澤秀子、花岡健二郎、長瀬健一
    • Organizer
      日本薬学会第142年会 (名古屋)
  • [Presentation] アルギニン密度制御による高分子ミセルの温度応答性ターゲティング2021

    • Author(s)
      鈴木杏奈、山田創太、佐々木栄太、長瀬健一、花岡健二郎
    • Organizer
      日本薬学会第142年会 (名古屋)
  • [Presentation] 複合的な相互作用を制御する温度応答性ミックスモードカラムの開発2021

    • Author(s)
      長瀬健一、渡邊真梨亜、善 文比古、松本光祐、花岡健二郎、金澤秀子
    • Organizer
      日本薬学会第142年会 (名古屋)
  • [Presentation] 温度応答性肝細胞分離クロマトグラフィーの開発2021

    • Author(s)
      松田潤之介、稲永大夢、後藤光昭、赤池敏宏、金澤秀子、花岡健二郎、長瀬健一
    • Organizer
      日本薬学会第142年会 (名古屋)

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Published: 2022-12-28  

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