2021 Fiscal Year Annual Research Report
Identification of proteins associated with ATXN8OS-related amyotrophic lateral sclerosis and treatment of iPS cell models
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19K07984
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| Research Institution | Kindai University |
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Principal Investigator |
平野 牧人 近畿大学, 医学部, 准教授 (50347548)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹原 俊幸 近畿大学, 大学病院, 助教 (60580561)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 筋萎縮性側索硬化症 / 核酸医薬品 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、ATXN8OS関連筋萎縮性側索硬化症(ALS)の病態解明とiPS細胞由来の運動ニューロンモデルの構築と治療法開発を目指す。さらに、ブレインバンクから検体を提供いただき、病理組織も用いて検証した。前年度までにATXN8OS変異陽性患者の人工多能性幹 (iPS)細胞1例は樹立しているが、それを運動ニューロン(iMN)へ誘導した。この疾患モデル細胞を用いた解析により、対照iMNと比べ、明らかに生細胞数の減少が観察された。しかし、残存する細胞の形態は、正常に近かった。ATXN8OS遺伝子内にあるCTA/CTG反復配列とその相補鎖側のATXN8遺伝子にあるCAG/TAG反復配列を検出する蛍光プロ―ブを用いたin situ hybridizationを行ったところ、両方のプローブともに、細胞質内の凝集が観察され、それらはTDP43と共在していた。また、iMNの治療介入のため、３種類のstrand-specific siRNAと３種類のアンチセンス核酸を設計・作製し、一過性トランスフェクションにより発現させたところ、２種類のsiRNAでALS患者由来iMNの生細胞数は有意に増加した。ATXN8OS関連ALS患者の病理学的な検討により、TDPは沈着したが、反復配列関連ATG非依存性(RAN)翻訳に基づき作製したペプチドに対する抗体を用いて免疫染色を行ったところ、運動ニューロンの一部に凝集が観察された。以上から、患者由来iMNは疾患モデルとして用いることができる可能性を示し、患者病理組織でも、TDPを中心とした病態が関与していることが示唆された。
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[Presentation] Gene analyses for spinocerebellar ataxia type 2 identify neuropathy phenotype in Japan.2022
Author(s)
Rino Inada, Makito Hirano, Nobuyuki Oka, Makoto Samukawa, Kazumasa Saigoh, Hidekazu Suzuki, Fukashi Udaka, Akihiro Hashiguchi, Hiroshi Takashima, Yukihiro Hamada, Yusaku Nakamura, Susumu Kusunoki
Organizer
第63回 日本神経学会総会
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[Presentation] Phenotypic variation and therapeutic strategy of SCA8-associated amyotrophic lateral sclerosis2022
Author(s)
Makito Hirano, Toshiyuki Takehara, Shigeo Murayama, Yuishin Izumi, Makoto Samukawa, Tomoyasu Matsubara, Yuko Saito, Kazumasa Saigoh, Yusaku Nakamura, Kanji Fukuda, Susumu Kusunoki, Yoshitaka Nagai
Organizer
第63回 日本神経学会総会
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