胃癌腹膜播種における腹腔内微小環境の免疫担当細胞の役割と機能解析

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18109
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 山口 貴久 金沢大学, 医学系, 協力研究員 (50781142)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: 胃癌腹膜播種 / がん免疫微小環境 / CD8陽性T細胞

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、胃癌腹膜播種における腹腔内の免疫微小環境に解明を目的として実験を施行している。
胃癌に対する免疫チェックポイント阻害剤の使用が行われ、key drugとなっている一方、腹膜播種などに対する限定的であり、胃癌腹膜播種の免疫微小環境は特殊なものであることが推察されるが、これまでほとんど報告がなく、未知な部分が多い。我々はこれまで、腫瘍部のCD8陽性T細胞高浸潤症例は低浸潤症例と比較し予後良好である一方で、CD33陽性MDSC高浸潤症例は低浸潤症例と比較して予後不良であることを明らかにした。また、化学療法に効果を示す症例では、腹水中のCD8陽性T細胞が増加し、一方で腫瘍関連マクロファージ（M2マクロファージ）は経時的に減少傾向にあることが分かった。
続いて、免疫正常マウスに、マウス由来胃癌細胞株とマウス由来線維芽細胞株を共培養し腹腔内投与を行うことで、腹膜播種モデルを作成した。比較群としてマウス由来胃癌細胞株の単独投与を行った。腹膜播種モデルは比較群と比べて、腹膜播種組織中のCD8陽性T細胞が低浸潤である一方、腫瘍関連マクロファージが高浸潤であった。このことから、腹膜播種の免疫環境において、癌関連線維芽細胞が主軸となり、CD8リンパ球の抑制、腫瘍関連マクロファージの凝集が生じている可能性が示唆された。このモデルを使用し、今後はPD-1抗体やその他の抗がん剤投与後のマウス腹腔内の免疫環境の解析を行う。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

腹膜播種において、癌関連線維芽細胞が腫瘍進展に重要な因子とされる。癌関連線維芽細胞を抑制する薬物として、トラニラストに注目し、腫瘍の縮小効果や免疫微小環境の改変に関して研究を施行している。トラニラストは線維芽細胞からのCXCL12分泌を抑制し、M2マクロファージの遊走能を阻害することが判明した。さらなる詳細なメカニズムを解析中である。実験内容、使用薬剤に変更が生じたためやや遅れている。

Strategy for Future Research Activity

In vivoにおいて、抗がん剤投与後の免疫微小環境に関してフローサイトメトリーを中心に研究を遂行する。また腹膜播種モデルにおいて、トラニラスト投与における、腫瘍縮小効果、またM2マクロファージ肥満細胞への影響、また免疫環境の解析を行う予定である。
また免疫正常マウス、ヌードマウスのいずれも使用し、効果に違いがあるのかも検討を行う。さらに、PD-1抗体を組み合わせることにより相乗効果があるのかも検討を行う。

Causes of Carryover

胃癌腹膜播種モデルの薬物投与実験での遅れが生じており、次年度での使用額が生じている。さらにマウス腹膜播種モデルを使用し、薬剤使用による線維芽細胞、肥満細胞への浸潤能、増殖能などの影響、また免疫環境の改変が生じるかに注目し実験を行う。