2020 Fiscal Year Research-status Report
Functional analysis and culture of human spermatogonial stem cells
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19K22512
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
篠原 隆司 京都大学, 医学研究科, 教授 (30322770)
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| Project Period (FY) |
2019-06-28 – 2022-03-31
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| Keywords | 精子形成 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト精子幹細胞を培養するためには、この細胞を精巣から効率よく回収する必要がある。表面抗原の同定を行ったところ、ヒト精子幹細胞ではチロシンキナーゼであるEPHA2を発現していることを昨年度に発見した。マウスの精巣においてはEPHA2の発現はA single spermatogoniaの中では極めて限局しており、これまで精子幹細胞のマーカー分子と言われているGFRA1よりも発現する細胞が少数であった。EPHA2は細胞増殖の促進を行うことが知られているために、このリガンド分子であるEPHRINーA1分子を培養細胞に加えてやることで、精子幹細胞の自己複製分裂を刺激できる可能性があると考えた。しかしながら、EPHA2の刺激のみでは精子幹細胞の増殖を誘導することは出来なかった。一方で上記の実験に加えて、EPHA2を指標にして回収したヒト精原細胞を利用して、ヒト精子幹細胞の増殖を刺激する分子を探す目的でケミカルライブラリーのスクリーニングを行った。用いたライブラリーはSelleck（1,224個）、Prestwick （1,120個）, Calbiochem （65個）; Tocris （1,280個）; Apexbio （2,525 個）である。この実験ではEPHA2発現細胞をmagnetic cell sortingにより回収し、mouse embryonic fibroblast上に培養し、上記の化合物と共に細胞増殖を刺激できるものを探索している。また全てのスクリーニングは終了しておらず、現在もスクリーニングを継続して行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定通り精子幹細胞の表面抗原を同定することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後も引き続きライブラリーのスクリーングを継続して行うと共に培地とフィーダー細胞についてより詳細な検討を行っていく予定である。
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| Causes of Carryover |
緊急事態宣言のために研究が遅延して全ての計画を終了できなかったため。
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