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2020 Fiscal Year Annual Research Report

アジアに展開する感染症研究拠点を活用した新型コロナウイルス感染症(COVID-19)に関する緊急研究

Research Project

Project/Area Number 19K24679
Research InstitutionNagasaki University

Principal Investigator

森田 公一  長崎大学, 熱帯医学研究所, 教授 (40182240)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 長谷部 太  長崎大学, 熱帯医学研究所, 教授 (20253693)
安田 二朗  長崎大学, 熱帯医学研究所, 教授 (10282518)
井上 真吾  長崎大学, 熱帯医学研究所, 准教授 (00346925)
櫻井 康晃  長崎大学, 感染症共同研究拠点, 助教 (00818338)
川口 寧  東京大学, 医科学研究所, 教授 (60292984)
松浦 善治  大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (50157252)
押谷 仁  東北大学, 医学系研究科, 教授 (80419994)
森 康子  神戸大学, 医学研究科, 教授 (50343257)
齋藤 玲子  新潟大学, 医歯学系, 教授 (30345524)
Project Period (FY) 2020-02-20 – 2021-03-31
Keywords新型コロナウイルス / COVID-19 / SARS-CoV-2 / 海外研究拠点 / 迅速診断法 / 蛍光LAMP法
Outline of Annual Research Achievements

初年度に開発したSARS-CoV-2の⊿N抗原ELISA法による血清診断系を長崎大学、東北大学、新潟大学で感度・特異度を検証した。長崎大学では中和抗体価を対象として感度・特異度は、91.2%, 93.7%と良好な値を示した。このシステムは2020年7月にベトナムのDa Nang市で発生した流行で一次血清9936検体、その後11月の二次血清1992検体の検査で利用された。また2021年1月下旬にHai Duong省で発生したUK型変異株による流行では流行初期に1943人の一次血清、3月に1263人から二次血清を採取しELISA法による血清調査を実施するとともに48株のSARS-CoV-2株を分離し、全ゲノム解析を実施しており現在論文を作成中である。さらに長崎大学と大阪大学で中和試験を安全に実施できるシュードウイルスを用いる測定系や抗原検出イムノクロマト法を開発した。
核酸検出系の開発では初年度に蛍光LAMP法を開発し公定法として認可を受け、2020年4月に長崎港で発生したクルーズ船の集団発生でRT-PCR法との比較検証の結果、感度・特異度ともに99.9%以上という高い一致率を確認した。また東京大学では、変異ウイルス株由来Sタンパク質を用いたウイルス膜融合系を樹立し、変異株ウイルス感染に対する薬剤、抗体等の迅速評価系を構築した。
インドネシアでは2021年3月の時点で総計約4万検体に2万例の陽性を確認し、流行初期に分離したウイルスの中に全ゲノム解析から2種類のスパイク変異を見出した。これらの変異型を同定するためのPCRプローブを作成し、各変異型の消長を調査した。その1つQ677H変異は4月下旬に東ジャワ州で発生し、5月以降この変異型は陽性検体の約10%を占めるに至っていたが、12月にその割合が30%に上昇した。この変異型の広域伝播の可能性を示唆しており監視継続の重要性を示した。

  • Research Products

    (52 results)

All 2021 2020 Other

All Int'l Joint Research (6 results) Journal Article (24 results) (of which Int'l Joint Research: 6 results,  Peer Reviewed: 24 results,  Open Access: 24 results) Presentation (16 results) (of which Int'l Joint Research: 7 results,  Invited: 12 results) Remarks (5 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Int'l Joint Research] ベトナム国立衛生疫学研究所(NIHE)(ベトナム)

    • Country Name
      VIET NAM
    • Counterpart Institution
      ベトナム国立衛生疫学研究所(NIHE)
  • [Int'l Joint Research] フィリピン熱帯医学研究所 (RITM)(フィリピン)

    • Country Name
      PHILIPPINES
    • Counterpart Institution
      フィリピン熱帯医学研究所 (RITM)
  • [Int'l Joint Research] ミャンマー国立衛生研究所(NHL)(ミャンマー)

    • Country Name
      MYANMAR
    • Counterpart Institution
      ミャンマー国立衛生研究所(NHL)
  • [Int'l Joint Research] 中国科学院 生物物理研究所/中国科学院 微生物研究所/中国農業科学院 ハルビン獣医研究所(中国)

    • Country Name
      CHINA
    • Counterpart Institution
      中国科学院 生物物理研究所/中国科学院 微生物研究所/中国農業科学院 ハルビン獣医研究所
  • [Int'l Joint Research] タイ国立予防衛生研究所(タイNIH)(タイ)

    • Country Name
      THAILAND
    • Counterpart Institution
      タイ国立予防衛生研究所(タイNIH)
  • [Int'l Joint Research]

    • # of Other Countries
      1
  • [Journal Article] COVID-19 cryptic transmission and genetic information blackouts: Need for effective surveillance policy to better understand disease burden2021

    • Author(s)
      Nabeshima Takeshi、Takazono Takahiro、Ashizawa Nobuyuki、Miyazaki Taiga、Inoue Shingo、Ngwe Tun Mya Myat、Izumikawa Koichi、Mukae Hiroshi、Moi Meng Ling、Morita Kouichi
    • Journal Title

      The Lancet Regional Health - Western Pacific

      Volume: 7 Pages: 100104~100104

    • DOI

      10.1016/j.lanwpc.2021.100104

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Behavioural responses and anxiety symptoms during the coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic in Japan: A large scale cross-sectional study2021

    • Author(s)
      Cai Guoxi、Lin Yulan、Lu Yixiao、He Fei、Morita Kouichi、Yamamoto Taro、Aoyagi Kiyoshi、Taguri Toshitsugu、Hu Zhijian、Alias Haridah、Danaee Mahmoud、Wong Li Ping
    • Journal Title

      Journal of Psychiatric Research

      Volume: 136 Pages: 296~305

    • DOI

      10.1016/j.jpsychires.2021.02.008

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Stability and infectivity of SARS-CoV-2 and viral RNA in water, commercial beverages and bodily fluids2021

    • Author(s)
      Mizuki Fukuta, Zhan Qiu Mao, Kouichi Morita, Meng Ling Moi
    • Journal Title

      Frontiers in Microbiology

      Volume: accepted Pages: accepted

    • DOI

      10.3389/fmicb.2021.667956

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] 5-amino levulinic acid inhibits SARS-CoV-2 infection in vitro2021

    • Author(s)
      Sakurai Yasuteru、Ngwe Tun Mya Myat、Kurosaki Yohei、Sakura Takaya、Inaoka Daniel Ken、Fujine Kiyotaka、Kita Kiyoshi、Morita Kouichi、Yasuda Jiro
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      Volume: 545 Pages: 203~207

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2021.01.091

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] iPSC screening for drug repurposing identifies anti‐RNA virus agents modulating host cell susceptibility2021

    • Author(s)
      Imamura Keiko、Sakurai Yasuteru、Enami Takako、Shibukawa Ran、Nishi Yohei、Ohta Akira、Shu Tsugumine、Kawaguchi Jitsutaro、Okada Sayaka、Hoenen Thomas、Yasuda Jiro、Inoue Haruhisa
    • Journal Title

      FEBS Open Bio

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1002/2211-5463.13153

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Inactivation of SARS-CoV-2 by Catechins from Green Tea2021

    • Author(s)
      Nishimura Hidekazu、Okamoto Michiko、Dapat Isolde、Katumi Masanori、Oshitani Hitoshi
    • Journal Title

      Japanese Journal of Infectious Diseases

      Volume: - Pages: -

    • DOI

      10.7883/yoken.JJID.2020.902

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Familial Clusters of Coronavirus Disease in 10 Prefectures, Japan, February-May 20202021

    • Author(s)
      Miyahara Reiko、Tsuchiya Naho、Yasuda Ikkoh、Ko Yura K.、Furuse Yuki、Sando Eiichiro、Nagata Shohei、Imamura Tadatsugu、Saito Mayuko、Morimoto Konosuke、Imamura Takeaki、Shobugawa Yugo、Nishiura Hiroshi、Suzuki Motoi、Oshitani Hitoshi
    • Journal Title

      Emerging Infectious Diseases

      Volume: 27 Pages: 915~918

    • DOI

      10.3201/eid2703.203882

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Roles of Public Health Centers and Cluster-Based Approach for COVID-19 Response in Japan2021

    • Author(s)
      Imamura Tadatsugu、Saito Tomoya、Oshitani Hitoshi
    • Journal Title

      Health Security

      Volume: 19 Pages: 229~231

    • DOI

      10.1089/hs.2020.0159

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Geographic Correlation between the Number of COVID-19 Cases and the Number of Overseas Travelers in Japan, Jan-Feb, 20202021

    • Author(s)
      Wagatsuma Keita、Phyu Wint Wint、Osada Hidekazu、Tang Julian W.、Saito Reiko
    • Journal Title

      Japanese Journal of Infectious Diseases

      Volume: 74 Pages: 157~160

    • DOI

      10.7883/yoken.JJID.2020.471

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Development of severe psychological distress among low-income individuals during the COVID-19 pandemic: longitudinal study2021

    • Author(s)
      Kikuchi Hiroyuki、Machida Masaki、Nakamura Itaru、Saito Reiko、Odagiri Yuko、Kojima Takako、Watanabe Hidehiro、Inoue Shigeru
    • Journal Title

      BJPsych Open

      Volume: 7 Pages: e50

    • DOI

      10.1192/bjo.2021.5

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Acceptance of a COVID-19 Vaccine in Japan during the COVID-19 Pandemic2021

    • Author(s)
      Machida Masaki、Nakamura Itaru、Kojima Takako、Saito Reiko、Nakaya Tomoki、Hanibuchi Tomoya、Takamiya Tomoko、Odagiri Yuko、Fukushima Noritoshi、Kikuchi Hiroyuki、Amagasa Shiho、Watanabe Hidehiro、Inoue Shigeru
    • Journal Title

      Vaccines

      Volume: 9 Pages: 210~210

    • DOI

      10.3390/vaccines9030210

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Discovery of New Fusion Inhibitor Peptides against SARS-CoV-2 by Targeting the Spike S2 Subunit2021

    • Author(s)
      Kandeel Mahmoud、Yamamoto Mizuki、Tani Hideki、Kobayashi Ayako、Gohda Jin、Kawaguchi Yasushi、Park Byoung Kwon、Kwon Hyung-Joo、Inoue Jun-ichiro、Alkattan Abdallah
    • Journal Title

      Biomolecules & Therapeutics

      Volume: Online ahead of print Pages: Online

    • DOI

      10.4062/biomolther.2020.201

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] The first 2019 novel coronavirus case in Nepal2020

    • Author(s)
      Bastola Anup、Sah Ranjit、Rodriguez-Morales Alfonso J、Lal Bibek Kumar、Jha Runa、Ojha Hemant Chanda、Shrestha Bikesh、Chu Daniel K W、Poon Leo L M、Costello Anthony、Morita Kouichi、Pandey Basu Dev
    • Journal Title

      The Lancet Infectious Diseases

      Volume: 20 Pages: 279~280

    • DOI

      10.1016/S1473-3099(20)30067-0

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Complete Genome Sequence of a 2019 Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) Strain Isolated in Nepal2020

    • Author(s)
      Sah Ranjit、Rodriguez-Morales Alfonso J.、Jha Runa、Chu Daniel K. W.、Gu Haogao、Peiris Malik、Bastola Anup、Lal Bibek Kumar、Ojha Hemant Chanda、Rabaan Ali A.、Zambrano Lysien I.、Costello Anthony、Morita Kouichi、Pandey Basu Dev、Poon Leo L. M.
    • Journal Title

      Microbiology Resource Announcements

      Volume: 9 Pages: -

    • DOI

      10.1128/MRA.00169-20

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Development and evaluation of a rapid and simple diagnostic assay for COVID-19 based on loop-mediated isothermal amplification2020

    • Author(s)
      Yoshikawa Rokusuke、Abe Haruka、Igasaki Yui、Negishi Saeki、Goto Hiroaki、Yasuda Jiro
    • Journal Title

      PLOS Neglected Tropical Diseases

      Volume: 14 Pages: e0008855

    • DOI

      10.1371/journal.pntd.0008855

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Association between Numbers of “Imported Cases” and “Reported Cases in a Source Country” of COVID-19: January to April 2020 in Japan2020

    • Author(s)
      Furuse Yuki、Oshitani Hitoshi
    • Journal Title

      Journal of Infection

      Volume: 81 Pages: e153~e154

    • DOI

      10.1016/j.jinf.2020.06.005

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Clusters of Coronavirus Disease in Communities, Japan, January-April 20202020

    • Author(s)
      Furuse Yuki、Sando Eiichiro、Tsuchiya Naho、Miyahara Reiko、Yasuda Ikkoh、Ko Yura K.、Saito Mayuko、Morimoto Konosuke、Imamura Takeaki、Shobugawa Yugo、Nagata Shohei、Jindai Kazuaki、Imamura Tadatsugu、Sunagawa Tomimasa、Suzuki Motoi、Nishiura Hiroshi、Oshitani Hitoshi
    • Journal Title

      Emerging Infectious Diseases

      Volume: 26 Pages: 2176~2179

    • DOI

      10.3201/eid2609.202272

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Viruses That Can and Cannot Coexist With Humans and the Future of SARS-CoV-22020

    • Author(s)
      Furuse Yuki、Oshitani Hitoshi
    • Journal Title

      Frontiers in Microbiology

      Volume: 11 Pages: 583252

    • DOI

      10.3389/fmicb.2020.583252

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Epidemiology of COVID-19 Outbreak in Japan, from January-March 20202020

    • Author(s)
      Furuse Yuki、Ko Yura K、Saito Mayuko、Shobugawa Yugo、Jindai Kazuaki、Saito Tomoya、Nishiura Hiroshi、Sunagawa Tomimasa、Suzuki Motoi、Oshitani Hitoshi、National Task Force for COVID-19 Outbreak in Japan
    • Journal Title

      Japanese Journal of Infectious Diseases

      Volume: 73 Pages: 391~393

    • DOI

      10.7883/yoken.JJID.2020.271

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Cluster-Based Approach to Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) Response in Japan, from February to April 20202020

    • Author(s)
      Oshitani Hitoshi、The Expert Members of The National COVID-19 Cluster Taskforce at The Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan
    • Journal Title

      Japanese Journal of Infectious Diseases

      Volume: 73 Pages: 491~493

    • DOI

      10.7883/yoken.JJID.2020.363

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Adoption of personal protective measures by ordinary citizens during the COVID-19 outbreak in Japan2020

    • Author(s)
      Machida Masaki、Nakamura Itaru、Saito Reiko、Nakaya Tomoki、Hanibuchi Tomoya、Takamiya Tomoko、Odagiri Yuko、Fukushima Noritoshi、Kikuchi Hiroyuki、Kojima Takako、Watanabe Hidehiro、Inoue Shigeru
    • Journal Title

      International Journal of Infectious Diseases

      Volume: 94 Pages: 139~144

    • DOI

      10.1016/j.ijid.2020.04.014

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Changes in implementation of personal protective measures by ordinary Japanese citizens: A longitudinal study from the early phase to the community transmission phase of the COVID-19 outbreak2020

    • Author(s)
      Machida Masaki、Nakamura Itaru、Saito Reiko、Nakaya Tomoki、Hanibuchi Tomoya、Takamiya Tomoko、Odagiri Yuko、Fukushima Noritoshi、Kikuchi Hiroyuki、Amagasa Shiho、Kojima Takako、Watanabe Hidehiro、Inoue Shigeru
    • Journal Title

      International Journal of Infectious Diseases

      Volume: 96 Pages: 371~375

    • DOI

      10.1016/j.ijid.2020.05.039

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] The actual implementation status of self-isolation among Japanese workers during the COVID-19 outbreak2020

    • Author(s)
      Machida Masaki、Nakamura Itaru、Saito Reiko、Nakaya Tomoki、Hanibuchi Tomoya、Takamiya Tomoko、Odagiri Yuko、Fukushima Noritoshi、Kikuchi Hiroyuki、Amagasa Shiho、Kojima Takako、Watanabe Hidehiro、Inoue Shigeru
    • Journal Title

      Tropical Medicine and Health

      Volume: 48 Pages: -

    • DOI

      10.1186/s41182-020-00250-7

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] The Anticoagulant Nafamostat Potently Inhibits SARS-CoV-2 S Protein-Mediated Fusion in a Cell Fusion Assay System and Viral Infection In Vitro in a Cell-Type-Dependent Manner2020

    • Author(s)
      Yamamoto Mizuki、Kiso Maki、Sakai-Tagawa Yuko、Iwatsuki-Horimoto Kiyoko、Imai Masaki、Takeda Makoto、Kinoshita Noriko、Ohmagari Norio、Gohda Jin、Semba Kentaro、Matsuda Zene、Kawaguchi Yasushi、Kawaoka Yoshihiro、Inoue Jun-ichiro
    • Journal Title

      Viruses

      Volume: 12 Pages: 629~629

    • DOI

      10.3390/v12060629

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] シンポジウム 「新型コロナウイルス感染症の疫学解析と政策還元の課題」2021

    • Author(s)
      押谷 仁
    • Organizer
      第31回日本疫学学会
    • Invited
  • [Presentation] Experience of Japan in response to COVID-192020

    • Author(s)
      押谷 仁
    • Organizer
      Trilateral Cooperation Secritariat(日中韓三国協力事務局) Webinar:Managing COVID-19 Pandemic- Experiences & Best Practices of China, Japan and the Republic of Korea
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] COVID-19: Policies in Japan and Alberta2020

    • Author(s)
      押谷 仁
    • Organizer
      Prince Takamado Japan Centre for Teaching and Research, University of Alberta
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Desarrollo y validacion de una prueba rapida molecular para la deteccion de SARS-CoV-2 empleado el metodo isotermico RPA-LF (Recombinase Polymerase Amplification)2020

    • Author(s)
      ホセ・マラガ
    • Organizer
      ENCUENTRO POR LA INVESTIGACION CAYETANO HEREDIA
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 特別企画「COVID-19―19人の専門家からのアップデート」 演題:クラスター対策2020

    • Author(s)
      押谷 仁
    • Organizer
      第61回日本臨床ウイルス学会
    • Invited
  • [Presentation] シンポジウム「新型コロナウイルス感染症の流行に対する日本の対応と世界」"Response to outbreak of Coronavirus disease 2019(COVID-19) of Japan 演題:COVID-19の流行とグローバルヘルスのあり方2020

    • Author(s)
      押谷 仁
    • Organizer
      第61回日本熱帯医学会大会 (グローバルヘルス合同大会2020大阪)
    • Invited
  • [Presentation] Cluster-based Approach in Japan2020

    • Author(s)
      押谷 仁
    • Organizer
      スタンフォード大学・神奈川県オンラインシンポジウム
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 【新型コロナウイルス分科会】テーマ:「日中両国やアジアでコロナ収束と経済再開をどう進めるか」2020

    • Author(s)
      押谷 仁
    • Organizer
      第16回東京‐北京フォーラム(言論NPO)
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Desarrollo y validacion de una prueba rapida molecular para la deteccion de SARS-CoV-2 empleado el metodo isotermico RPA-LF (Recombinase Polymerase Amplification)2020

    • Author(s)
      ホセ・マラガ
    • Organizer
      XIV CONGRESO CIENTIFICO INTERNACIONAL
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] アジアが風邪をひくと日本がくしゃみする!2020

    • Author(s)
      齋藤玲子
    • Organizer
      第123回日本小児科学会学術集会 分野別シンポジウム
    • Invited
  • [Presentation] COVID-19-19人の専門家からのアップデート,7.検査法(PCR、抗原、抗体)2020

    • Author(s)
      齋藤玲子
    • Organizer
      第61回日本臨床ウイルス学会 特別企画
    • Invited
  • [Presentation] ミャンマーのインフルエンザ流行と呼吸器感染症2020

    • Author(s)
      齋藤玲子
    • Organizer
      第61回日本臨床ウイルス学会 シンポジウム
    • Invited
  • [Presentation] Geographic correlatiom between the number of COVID-19 cases and the number of overseas travelers in Japan, January-February 20202020

    • Author(s)
      Keita Wagatsuma, Wint Wint Phyu, Hidekazu Osada, Julian W, Tang, Reiko Saito
    • Organizer
      The special isirv-AVG virtual Conference, Therapeutics for COVID-19
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 2020年1-2月の日本におけるCOVID-19症例数と海外渡航客数の地理的な相関2020

    • Author(s)
      我妻奎太 Wint Wint Phyu 長田秀和 齋藤玲子
    • Organizer
      グローバルヘルス合同大会2020大阪
  • [Presentation] 新型コロナウイルスの疫学2020

    • Author(s)
      齋藤玲子
    • Organizer
      新潟医学会特別例会
  • [Presentation] SARS-CoV-2 S依存的な細胞融合アッセイによる抗血液凝固剤ナファモスタットの抗ウイルス感染作用の発見2020

    • Author(s)
      山本瑞生、井上純一郎、川口寧、合田仁
    • Organizer
      第43回日本分子生物学会年会
  • [Remarks] 新型コロナウイルス感染症(COVID-19)に関する長崎大学熱帯医学研究所の活動

    • URL

      http://www.tm.nagasaki-u.ac.jp/nekken/covid-19/

  • [Remarks] 長崎大学新型コロナウイルス感染症対策動画集

    • URL

      https://www.ccpid.nagasaki-u.ac.jp/covid-19/

  • [Remarks] リコンビナーゼポリメラーゼ増幅法によるSARS-CoV-2の検出のための迅速な分子検査の開発と検証

    • URL

      https://www.facebook.com/FondecytPeru/videos/taller-de-difusi%C3%B3n-de-resultados/599029280774474/

  • [Remarks] リコンビナーゼポリメラーゼ増幅法によるSARS-CoV-2の検出のための迅速な分子検査の開発と検証

    • URL

      https://www.pe.emb-japan.go.jp/itprtop_ja/11_000001_00385.html

  • [Remarks] フィリピン国の感染制御における日本の貢献

    • URL

      https://www.youtube.com/watch?v=1JzqxgaWoUE

  • [Patent(Industrial Property Rights)] SARS-CoV-2検出用プライマーセット、SARS-CoV-2を検査するための方法、SARS-CoV-2の検査試薬および検査キット2020

    • Inventor(s)
      安田二朗、吉川禄助他
    • Industrial Property Rights Holder
      長崎大学、キヤノンメディカル
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      PCT/JP2020/023401

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Published: 2021-12-27  

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