誤標的された正常細胞をも抗がんに動員する統合的遺伝子治療の新戦略

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20015031
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 許 南浩 Okayama University, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (70142023)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 阪口 政清 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (70379840) ; 片岡 健 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (10293317)
• Keywords: REIC / Dkk-3 / がん抑制遺伝子 / がん遺伝子治療

Research Abstract

REIC/Dkk-3発現アデノウイルスベクター(Ad-REIC)のスキルス胃癌への適用
スキルス胃癌は進行が早く腹膜やリンパ節に転移しやすい難治性のがんの一つである。現在、本がん種を標的とした有効な治療法がない。本年度では、Ad-REICのスキルス胃癌への有効性を検討する目的で、胃がん腹膜播種動物モデルを新規に開発した。Ad-REICを服腔内に投与したところ、胃がん細胞株の腹膜播種の有為な抑制が観察された。これは、Ad-REICの直接効果(がん細胞特異的細胞死誘導)とAd-REICにより誤標的された正常細胞を介した間接効果(正常細胞がIL-7を産生してNK細胞の活性化を誘導)によることが明らかとなった(論文準備中)。
Ad-REICの改良
Ad-REICによるアポトーシス誘導作用を高めるために、強力な遺伝子発現システムを独自に開発した。結果、従来のプロモーター(CAGやCMV)を用いた遺伝子発現システムに比較して顕著な遺伝子発現増強効果(各種遺伝子で、100倍から1000倍)が達成された。このシステムをAd-REICに組み込むことにより、現存のAd-REICを上回る治療効果が期待できる(論文準備中)。
分泌REIC/Dkk-3タンパク質の機能の解明
分泌型REIC/Dkk-3も免疫系を介した間接的抗腫瘍効果を示す。REIC/Dkk-3の発現組織と分泌されたREIC/Dkk-3を積極的に取り込む細胞の同定を行ったところ、分泌されたREIC/Dkk-3は末梢血単球の樹上細胞様細胞への分化・増殖を制御している可能性が示唆された。
REIC/Dkk-3ノックアウトマウスの作製
癌抑制遺伝子REIC/Dkk-3の主要ドメインであるEXON 5、6を全身性にノックアウトしたマウスの作成を行っていたが、2009年10月に、ホモノックアウトマウスの作成に成功した。

Research Products

• [Journal Article] Down-regulation of BiP/CRP78 sensitizes resistant prostate cancer cells to gene-therapeutic overexpression of REIC/Dkk3 (2010)
  • Author(s): Tanimoto R, Sakaguchi M, Abarzua F, Kataoka K, Kurose K, Murata H, Nasu Y, Kumon H, Huh NH
  • Journal Title: Int J Cancer 126 Pages: 1562 1569
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] REIC/Dkk-3 overexpression downregulates P-glycoprotein in multidrug-resistant MCF7/ADR cells and induces apoptosis in breast cancer (2009)
  • Author(s): Kawasaki K, Watanabe M, Sakaguchi M, Ogasawara Y, Ochiai K, Nasu Y, Doihara H, Kashiwakura Y, Huh NH, Kumon H, Date H
  • Journal Title: Cancer Gene Ther 16 Pages: 65 72
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Immunological aspects of REIC/Dkk-3 in monocyte differentiation and tumor regression (2009)
  • Author(s): Watanabe M, Kashiwakura Y, Huang P, Ochiai K, Fu tami J, Li SA, Takaoka M, Nasu Y, Sakaguchi M, Huh NH, Kumon H
  • Journal Title: Int J Oncol 34 Pages: 657 663
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Overexpression of REIC/Dkk-3 in normal fibroblasts suppresses tumor growth via induction of IL-7 (2009)
  • Author(s): Sakaguchi M, Kataoka K, Abarzua F, Tanimoto R, Watanabe M, Murata H, Than SS, Kurose K, Kashiwakura Y, Ochiai K, Nasu Y, Kumon H, Huh NH
  • Journal Title: J Biol Chem 284 Pages: 14236 14244
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Suppression of carbon tetrachloride-induced liver fibrosis by transplantation of a clonal mesenchymal stem cell line derived from rat bone marrow (2009)
  • Author(s): Hardjo M, Miyazaki M, Sakaguchi M, Masaka T, Ibrahim S, Kataoka K, Huh NH
  • Journal Title: Cell Transplant 18 Pages: 89 99
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] REIC/Dkk-3 stable transfection reducesthe malignant phenotype of mouse prostate cancer RM9 cells (2009)
  • Author(s): Chen J, Watanabe H, Huang P, Sakaguchi M, Ochiai K, Nasu Y, Ouchida M, Huh NH, Shimizu K, Kashiwakura Y, Kaku H, Kumon H
  • Journal Title: Int J Mol Med 24 Pages: 789 794
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Normal human fibroblasts mis-targetedly infected with adenovirus REIC have a tumor-suppressive ability in vivo (2009)
  • Author(s): 阪口政清、片岡健、フェルナンドアバルスア、谷本竜太、渡邉昌美、村田等、スエスエタン、那須保友、公文裕巳、許南浩
  • Organizer: 第32回日本分子生物学会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2009-12-12
• [Presentation] Promoter-based improvement of gene expression in cancer therapeutic adenovirus vector carrying REIC/Dkk-3 (2009)
  • Author(s): 阪口政清、片岡健、村田等、許南浩
  • Organizer: 第68回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2009-10-03
• [Patent(Industrial Property Rights)] 遺伝子発現を上昇させるシステム及ぴ該システムを保持したべクター (2009)
  • Inventor(s): 阪口政清、公文裕巳、許南浩、渡邉昌美
  • Industrial Property Rights Holder: 岡山大学
  • Industrial Property Number: 特願2009-264299号
  • Filing Date: 2009-11-19