ヒト胚性幹細胞から造血幹細胞移植治療のための造血幹細胞への分化誘導法の開発

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20390291
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 辻 浩一郎 The University of Tokyo, 医科学研究所, 准教授 (50179991)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 海老原 康博 東京大学, 医科学研究所, 助教 (40302608)
• Keywords: 再生医療 / バイオテクノロジー / 間葉系幹細胞 / 移植 / ヒト胚性幹細胞

Research Abstract

1)ヒト胚性幹細胞(ES細胞)からストローマ細胞への動物血清および細胞非依存的分化誘導方の開発
マウス胎仔組織由来ストローマ細胞に依存しないヒトES細胞から造血/血液細胞への分化誘導法を確立するために、マウス胎仔組織由来ストローマ細胞の代替細胞として、ヒトES細胞からのストローマ細胞を樹立することを試みた。マウス繊維芽細胞(MEF)との共培養により維持されたヒトES細胞コロニーをピックアップし、MEFをコートしていないゼラチンコートプレートで1コロニーずつ再培養した。以後、platelet lysate(PL)を5%vol含む培養液(PL培養液)を用いて継代培養した。PL培養液の交換は週2回行い、7-14日間隔で継代した。その結果、ヒトES細胞からadherentなストローマ様細胞が生成された。数代継代後には、MEF由来のマウス細胞や未分化なヒトES細胞は、PCRレベルでも認められなくなった。フローサイトメトリーによる表面抗原の解析では、CD105,CD166陽性、CD45,CD34,CD14陰性であったことより、これらのストローマ細胞は間葉系幹細胞であると考えられ、骨、軟骨、脂肪細胞などの間葉系細胞への分化能力を有することも確認された。
2)ヒトES細胞由来ストローマ細胞を用いたヒト造血/血液細胞の分化誘導
上記の方法でヒトES細胞から分化誘導されたストローマ細胞との共培養により、未分化なヒトES細胞から造血/血液細胞への分化誘導を試みた。

Research Products

• [Journal Article] IRES-dependent expression is required for AML 1-mediated angiogenesis and hematopoiesis and for AML 1 fusion protein-induced leukemogenesis. (2010)
  • Author(s): Miyazaki K, Ma F, Yamasaki N, Oda H, Miyazaki M, Honda Z, Okuda T, Tsuji K, Honda H
  • Journal Title: Dev Biol. (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Adhesion-mediated self-renewal abilities of Ph+blastoma cells. (2010)
  • Author(s): Funayama K, Saito-Kurimoto Y, 海老原康榑, Shimane Y, Nomura H, 辻浩一郎, Asano S
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation of blood cells from human ES cells and embryonic hematopoiesis. (2010)
  • Author(s): Ma F, Yang W, 辻浩一郎
  • Journal Title: J Pediatr Biochem (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] iPS細胞からの血液誘導 (2009)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Journal Title: 臨床検査 6 Pages: 737-743
• [Journal Article] Application of whole mouse embryo culture system on stem cell research. (2009)
  • Author(s): Kulkeaw K, Mizuochi C, Horio Y, Osumi N, Tsuji K, Sugiyama D.
  • Journal Title: Stem Cell Rev & Rep. 5 Pages: 175-180
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] ヒトES細胞からの血液細胞の産生. (2009)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Journal Title: 人工血液 17 Pages: 29-36
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] (2009)
  • Author(s): 海老原康榑
  • Journal Title: 小児がん.がん患者の心に寄り添うためのサイコオンコロジーの基礎と実践.大木桃代編(真興交易医書出版部) Pages: 43-47
• [Presentation] 慢性骨髄性白血病に対する骨髄破壊的前処置を用いた臍帯血移植 (2010)
  • Author(s): 河北敏郎, 大井淳, 高橋聡, 塚田信弘, 加藤せい子, 佐藤亜紀, 永田泰之, 海老原康博, 辻浩一郎, 浅野茂隆, 東條有伸
  • Organizer: 第32回日本造血細胞移植学会
  • Place of Presentation: 浜松
  • Year and Date: 20100219-20100220
• [Presentation] 再発・難治性白血病4例に対するIDA-FLAG療法の効果および有効性 (2009)
  • Author(s): 渡辺温子, 田中竜平, 正田絵里子, 水野圭子, 森脇浩一, 海老原康博
  • Organizer: 第51回日本小児血液学会
  • Place of Presentation: 舞浜
  • Year and Date: 20091127-20091129
• [Presentation] Second or third myeloablative allo-SCT using cord blood for adult leukemia. (2009)
  • Author(s): 加藤せい子, 大井淳, Tahashi S, Tsukada N, Sato A, Konuma T, 河北敏郎, Nagata Y, 海老原康博, 辻浩一郎, 東條有伸, 浅野茂隆.
  • Organizer: 第71回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 20091023-20091025
• [Presentation] Human ES cell-derived MSC maintining human ES and iPS cells under animal serum-free conditions. (2009)
  • Author(s): 海老原康博, 馬峰, Hanada S, Tomizawa D, 辻浩一郎, Oyaizu N.
  • Organizer: 第71回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 20091023-20091025
• [Presentation] Derivation of mature blood cells from human induced pluripotent stem cells. (2009)
  • Author(s): 馬峰, 海老原康博, Nakauchi H, 辻浩一郎
  • Organizer: 38th Annual Scientific Meeting of the International Society of Experimental Hematology
  • Place of Presentation: Athens, Greece
  • Year and Date: 20090909-20090912
• [Presentation] Human embryonic stem(ES)cell-derived mesenchymal stem cells capable of efficiently maintaining human ES and induced pluripotent stem cells under animal serum-free conditions. (2009)
  • Author(s): 海老原康博, 馬峰, Hanada S, Tomizawa D, 辻浩一郎, Ononda H, Oyaizu N.
  • Organizer: 7th Annual Meeting of the International Society of Stem Cell Research
  • Place of Presentation: Barcelona, Spain
  • Year and Date: 20090708-20090711
• [Presentation] Derivation of multipotential hematopoietic progenitors and mature blood cells from human induced pluripotent stem cells. (2009)
  • Author(s): 馬峰, 海老原康博, Nakauchi H, 辻浩一郎
  • Organizer: 7th Keio Stem Cell Research Symposium
  • Place of Presentation: Tokyo, Japan
  • Year and Date: 20090515-20090516
• [Presentation] 15-20歳の思春期症例に対する臍帯血移植の検討 (2009)
  • Author(s): 海老原康博, 辻浩一郎
  • Organizer: 第112回日本小児科学会学術集会
  • Place of Presentation: 奈良
  • Year and Date: 20090417-20090419
• [Presentation] Regenerative medicine and hematopoietic stem cells. (2009)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Organizer: Educational Symposium for Current Pediatric Hematology
  • Place of Presentation: Tianjin, China
  • Year and Date: 2009-09-18
• [Presentation] Regenerative medicine based on human ES/iPS cells. (2009)
  • Author(s): 馬峰
  • Organizer: Educational Symposium for Current Pediatric Hematology
  • Place of Presentation: Tianjin, China
  • Year and Date: 2009-09-18
• [Book] Regenerative medicine based on human ES and iPS cells.
  • Author(s): 馬峰, Yang W, 辻浩一郎.
  • Publisher: Stem cells in medicine. edited by Isobe K(Transworld Research Network, Kerala)(in press)
• [Book] 胎生期の造血.臍帯血移植の基礎と臨床、浅野茂隆、谷口克編
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Publisher: 医学書院(東京)(印刷中)
• [Book] 医学書院(東京)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Publisher: Myelodysplastic symdrome.今日の小児治療指針、大関武彦、古川漸、横田俊一郎、水口雅編(印刷中)
• [Remarks]
  • URL: http://stemcell-u-tokyo.org/scp/
• [Patent(Industrial Property Rights)] 多能性幹細胞からの肥満細胞の製造方法 (2009)
  • Inventor(s): 辻浩一郎、馬峰、中畑龍俊
  • Industrial Property Rights Holder: 国立大学法人京都大学
  • Industrial Property Number: 61/240,376
  • Filing Date: 2009-09-08
  • Overseas