2009 Fiscal Year Annual Research Report
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20590482
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research |
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Principal Investigator |
小池 智 Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research, 東京都臨床医学総合研究所, 副参事研究員 (30195630)
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| Keywords | エンテロウイルス71 / ウイルス受容体 / 発現クローニング / マイクロアレイ |
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| Research Abstract |
エンテロウイルス71はピコルナウイルス科エンテロウイルス属に属するウイルスで、コクサッキーウイルスA16などと共に乳幼児に手足口病を引き起こすことが知られている。このウイルスはヒト由来の培養細胞RD細胞には感染するが、マウス由来のL929などにはほとんど感染が成立しない。ところがL929細胞にウイルスRNAをトランスフェクションすれば子孫のウイルス粒子が産生されることから、L929細胞への感染不成立はウイルスの感染初期段階(細胞への吸着,侵入、脱殻など)がうまくいかないためであると考えられた。そこでこの細胞にヒトRD細胞のゲノムDNAをトランスフェクションして形質転換細胞株群を得て、その中からウイルス感受性を獲得した株をクローニングした。この形質転換細胞Ltr051細胞ともとのL929細胞からRNAを調整し、Whole Human Genome Microarray kit 4x44K(Agilent)を用いてLtr051細胞に発現があり、L929細胞に発現のない遺伝子の同定を試みた。複数の遺伝子候補が見いだされたが、Scavenger receptor B2(SCARB2)遺伝子が導入されている事を確認した。この遺伝子の全長cDNAをクローニングして単独でL929細胞に発現させたところ、細胞はウイルス感受性を獲得したことなどからこの分子がエンテロウイルス71受容体であることと同定した。マウスにはヒトのこの遺伝子と相同なマウスScarb2が存在する。この遺伝子を過剰発現するとウイルス受容体としての活性を示すが、ヒトSCARB2と比較するとその活性は低い。両者のキメラを作製することにより、ヒトSCARB2のウイルス感染成立に重要であると考えられる部分を同定した。感染成立に重要な部位の同定が可能になったことにより、マウスScarb2のその部分をヒト型に置換し、EV71感染モデル動物を作製する可能性が開けた。
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Research Products
(8 results)
