ヒトES細胞から免疫細胞への分化系を用いた乳児アレルギー疾患発症機構に関する研究

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20591244
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 馬 峰 The University of Tokyo, 医科学研究所, 特任研究員 (20378748)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 辻 浩一郎 東京大学, 医科学研究所, 准教授 (50179991)
• Keywords: アレルギー / ヒトES細胞 / 結合組織型肥満細胞 / アトピー性皮膚炎 / 好酸球

Research Abstract

1)ヒトES細胞から結合組織型肥満細胞(CTMC)への分化誘導法の確立
ヒトES細胞から、アトピー性皮膚炎の主たるエフェクター細胞である結合組織型肥満細胞への分化誘導を試みた。ヒトES細胞をマウス胎仔組織由来ストローマ細胞と2週間共培養した後、SGF、FL、IL-3、IL-6、TPO存在下で1週間液体培養する。そのあと、さらに6～10週間同様のサイトカイン存在下で無血清培養することにより、95%以上の細胞が肥満細胞となることが、光学顕微鏡および電子顕微鏡による形態学的観察から確認された。さらに、これらの肥満細胞の顆粒は、tryptase、chymaseいずれも陽性のCTMCであることが確認され、その他に、これらのCTMCは、c-Kit、CRA-1、cathepsin-G、carboxypeptidase-A、CD88、CD203cも強く発現していた。
2)ヒトES細胞から好酸球への分化誘導法の確立
これまで、アレルギー疾患の病因・病態おける役割や、その胎生期の発達についてほとんど解明されていない好酸球を、ヒトES細胞から分化誘導することを試みた。ヒトES細胞をマウス胎仔組織由来ストローマ細胞と1週間共培養した後、分化誘導された造血前駆細胞をSCF、IL-3、IL-6、GM-CSF存在下で液体培養した。培養2週間後には、培養細胞の80～90%が、細胞質内に多数の好酸性顆粒を有する細胞となり、それらの細胞はEPO(eosinophil peroxidase)、MBP(major basic protein)陽性で、電子顕微鏡による観察から好酸球であることが確認できた。

Research Products

• [Journal Article] IRES-dependent expression is required for AML 1-mediated angiogenesis and hematopoiesis and for AML 1 fusion protein-induced leukemogenesis. (2010)
  • Author(s): Miyazaki K, Ma F, Yamasaki N, Oda H, Miyazaki M, Honda Z, Okuda T, Tsuji K, Honda H
  • Journal Title: Dev Biol. (in press.)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Adhesion-mediated self-renewal abilities of Ph+ blastoma cells. (2010)
  • Author(s): Funayama K, Saito-Kurimoto Y, Ebihara Y, Shimane Y, Nomura H, Tsuji K, Asano S
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun (in press.)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation of blood cells from human ES cells and embryonic hematopoiesis. (2010)
  • Author(s): Ma F, Yang W, Tsuji K
  • Journal Title: J Pedatir Biochem (in press.)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Application of whole mouse embryo culture system on stem cell research (2009)
  • Author(s): Kulkeaw K, Mizuochi C, Horio Y, Osumi N, Tsuji K, Sugiyama D.
  • Journal Title: Stem Cell Rev & Rep. 5 Pages: 175-180
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] ヒトES細胞からの血液細胞の産生 (2009)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Journal Title: 人工血液 17 Pages: 29-36
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] iPS細胞からの血液誘導 (2009)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Journal Title: 臨床検査 Pages: 737-743
• [Journal Article] (2009)
  • Author(s): 海老原康博
  • Journal Title: 小児がん. がん患者の心に寄り添うためのサイコオンコロジーの基礎と実践.(大木桃代編)(真興交易医書出版部) Pages: 43-47
• [Presentation] 慢性骨髄性白血病に対する骨髄破壊的前処置を用いた臍帯血移植 (2010)
  • Author(s): 河北敏郎, 大井淳, 高橋聡, 塚田信弘, 加藤せい子, 佐藤亜紀, 永田泰之, 海老原康博, 辻浩一郎, 浅野茂隆, 東條有伸
  • Organizer: 第32回日本造血細胞移植学会
  • Place of Presentation: 浜松
  • Year and Date: 20100291-20100220
• [Presentation] 再発・難治性白血病4例に対するIDA-FLAG療法の効果および有効性 (2009)
  • Author(s): 渡辺温子, 田中竜平, 正田絵里子, 水野圭子, 森脇浩一, 海老原康博
  • Organizer: 第51回日本小児血液学会
  • Place of Presentation: 舞浜
  • Year and Date: 20091127-20091129
• [Presentation] Second or third myeloblative allo-SCT using cord blood for adult leukemia. (2009)
  • Author(s): Kato S, Ooi J, Tahashi S, Tsukada N, Sato A, Konuma T, Kawakita T, Nagata Y, Ebihara Y Tsuji K, Tojo A, Asano S.
  • Organizer: 第71回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 20091023-20091025
• [Presentation] Human ES cell-derived MSC maintining human ES and iPS cells under animal serum-free conditions. (2009)
  • Author(s): Ebihara Y, Ma F, Hanada S, Tomizawa D, Tsuji K, Oyaizu N.
  • Organizer: 第71回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 20091023-20091025
• [Presentation] Derivation of mature blood cells from humam induced pluripotent stem cells. (2009)
  • Author(s): Ma F, Ebihara Y, Nakauchi H, Tsuji K.
  • Organizer: 38th Annual Scientific Meeting of the International Society of Experimental Hematology
  • Place of Presentation: Athens, Greece
  • Year and Date: 20090909-20090912
• [Presentation] Human embryonic stem(ES)cell-derived mesenchymal stem cells capable of efficiently maintaining human ES and induced pluripotent stem cells under animal serum-free conditions (2009)
  • Author(s): Ebihara Y, Ma F, Hanada S, Tomizawa D, Tsuji K, Ononda H, Oyaizu N.
  • Organizer: 7th Annual Meeting of the International Society of Stem Cell Research
  • Place of Presentation: Barcelona, Spain
  • Year and Date: 20090708-20090711
• [Presentation] 15-20歳の思春期症例に対する臍帯血移植の検討 (2009)
  • Author(s): 海老原康博, 辻浩一郎
  • Organizer: 第112回日本小児科学会学術集会
  • Place of Presentation: 奈良
  • Year and Date: 20090417-20090419
• [Presentation] Derivation of multipotential hematopoietic progenitors and mature blood cells from human induced pluripotent stem cells. (2009)
  • Author(s): Ma F, Ebihara Y, Nakauchi H, Tsuji K.
  • Organizer: 7th Keio Stem Cell Research Symposium
  • Place of Presentation: Tokyo, Japan
  • Year and Date: 20090315-20090316
• [Presentation] Regenerative medicine and hematopoietic stem cells. (2009)
  • Author(s): Tsuji K.(Invited Speaker)
  • Organizer: Educational Symposium for Current Pediatric Hematology
  • Place of Presentation: Tianjin, China
  • Year and Date: 2009-09-18
• [Presentation] Regenerative medicine based on human ES/iPS cells. (2009)
  • Author(s): Ma F
  • Organizer: Educational Symposium for Current Pediatric Hematology
  • Place of Presentation: Tianjin, China
  • Year and Date: 2009-09-18
• [Book] Regenerative medicine based on human ES and iPS cells. (2010)
  • Author(s): Ma F, Yang W, Tsuji K.
  • Publisher: Stem cells in medicine. edited by Isobe K(Transworld Research Network, Kerala)(in press)
• [Book] 胎生期の造血.臍帯血移植の基礎と臨床(浅野茂隆、谷口克編) (2010)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Publisher: 医学書院(東京)(印刷中)
• [Book] 医学書院(東京) (2010)
  • Author(s): 辻浩一郎
  • Publisher: Myelodysplastic symdrome.今日の小児治療指針、大関武彦、古川漸、横田俊一郎、水口雅編(印刷中)
• [Remarks]
  • URL: http://stemcell-u-tokyo.org/scp/
• [Patent(Industrial Property Rights)] 多能性幹細胞からの肥満細胞の製造方法 (2009)
  • Inventor(s): 辻浩一郎, 馬峰, 中畑龍俊
  • Industrial Property Rights Holder: 国立大学法人 京都大学
  • Industrial Property Number: 61/240,376
  • Filing Date: 2009-09-08
  • Overseas