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2011 Fiscal Year Annual Research Report

植物ウイルスに対する防御ネットワークに関わる宿主遺伝子の解析

Research Project

Project/Area Number 20688002
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

中原 健二  北海道大学, 大学院・農学研究院, 助教 (90315606)

KeywordsRNAサイレンシング / カルモジュリン様タンパク / オートファジー / 植物自然免疫 / PAMPs / 植物ウイルス
Research Abstract

今年度は本研究で見出したタバコのカルモジュリン様タンパク(rgs-CaM)を介した防御ネットワークを裏付ける分子メカニズムについて解析・検証を進めた。まず、(1)タンパク分解系ユビキチン-26Sプロテアソームとオートファジーの阻害剤を用いた解析を行い、rgs-CaMとRSSタンパクは結合するとすぐにオートファジーにより分解されていることが示唆された。さらに、(2)タバコからプロトプラストを調整して、rgs-CaMを過剰発現すると活性酸素の産生や細胞死が観察された。これらは、サリチル酸シグナルなどの防御反応を誘導することが知られており、rgs-CaMがそれらを介してRNAサイレンシング以外の防御機構を活性化することが示唆された。(3)また、rgs-CaMがRSSだけでなくウイルスの外皮タンパク(CP)とも結合する可能性について検証した。その結果、アグロインフィルトレーションにより一過発現したウイルスCPとrgs-CaMの結合が確認されたことから、rgs-CaMとウイルスCPは他のウイルスタンパクを介さずに結合できることが分かった。rgs-CaMとウイルスCPの結合がどのように宿主やウイルスに作用しているのか、今後の興味深い研究課題の一つである。(1)(2)の結果とこれまでの本研究課題の成果からウイルスに対する自然免疫機構について次に示す新たなモデルが考えられた。rgs-CaMはウイルスRSSの2本鎖RNA/siRNA結合領域に親和性を持つことで普遍的にRSSに結合し、ウイルスの侵入を感知して自身の発現を誘導する。すなわちrgs-CaMはRSSをウイルスの病原関連基本パターン分子(PAMPs)として認識する受容体で、さらにrgs-CaM自身が、結合したRSSをオートファジーによる分解に導くことで宿主のRNAサイレンシングによる抗ウイルス活性を高めるとともに、他の防御機構も活性化してウイルスに対抗していることが示唆された。本研究の集大成として、このモデルを広く提唱するために、現在、米国科学アカデミー紀要に改訂稿を投稿中である。

  • Research Products

    (11 results)

All 2012 2011

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (5 results)

  • [Journal Article] White clover mosaic virus-induced gene silencing in pea2012

    • Author(s)
      Yukari Ido, Kenji S. Nakahara, Ichiro Uyeda
    • Journal Title

      Journal of General Plant Pathology

      Volume: 78 Pages: 127-132

    • DOI

      DOI:10.1007/s10327-012-0360-3

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Characterization of the recessive resistance gene cyv1 against Clover yellow vein virus in Pisum sativum2012

    • Author(s)
      Choi, SH, et al.
    • Journal Title

      Journal of General Plant Pathology

      Volume: (In press)(印刷中)(未定)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Heterologous expression of viral suppressors of RNA silencing complements virulence of the HC-Pro mutant of clover yellow vein virus in pea2012

    • Author(s)
      Atsumi, G, et al.
    • Journal Title

      Archives of Virology

      Volume: (In press)(印刷中)

    • DOI

      10.1007/s00705-012-1281-3

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Screening and analysis of genes expressed upon infection of broad bean with Clover yellow vein virus causing lethal necrosis2011

    • Author(s)
      Kenji S. Nakahara, Hiroaki Kitazawa, GoAtsumi, Sun Hee Choi, Yuji Suzuki, Ichiro Uyeda
    • Journal Title

      Virology Journal

      Volume: 8 Pages: 355

    • DOI

      DOI:10.1186/1743-422X-8-355

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cargo sorting to lysosome-related organelles regulates siRNA-mediated gene silencing2011

    • Author(s)
      Dinari A. Harris, Kevin Kim, Kenji Nakahara, Constanza Vasquez-Doorman, and Richard W. Carthew
    • Journal Title

      Journal of Cell Biology

      Volume: 194 Pages: 77-87

    • DOI

      DOI:10.1083/jcb.201102021

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Sensitive PCR-based detection of Apple chlorotic leaf spot virus heterogenous in apple trees2011

    • Author(s)
      Kenji S. Nakahara, Kouji Yoshida, Tsutae Ito, Kouichi Suzaki and Nobuyuki Yoshikawa
    • Journal Title

      Japan Agricultural Research Quarterly

      Volume: 45 Pages: 411-421

    • DOI

      DOI:10.6090/jarq.45.411

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] タバコのウイルスに対する基礎免疫におけるカルモジュリン様タンパクrgs-CaMの役割22012

    • Author(s)
      中原健二
    • Organizer
      平成24年度日本植物病理学会大会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場(福岡)
    • Year and Date
      2012-03-29
  • [Presentation] P3N-PIPOはcyv1エンドウに対するクローバ葉脈黄化ウイルスの病原性に関与する2012

    • Author(s)
      崔善熹
    • Organizer
      平成24年度日本植物病理学会大会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場(福岡)
    • Year and Date
      2012-03-29
  • [Presentation] RNAサイレンシングを強化するタバコのウイルス防御機構2011

    • Author(s)
      中原健二
    • Organizer
      北海道植物学会大会
    • Place of Presentation
      北海道大学大学院地球環境科学研究院(札幌)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-12-02
  • [Presentation] An rgs-CaM-mediated countermeasure for RNAi-based antiviral immunity in tobacco2011

    • Author(s)
      Nakahara, K
    • Organizer
      IUMS, XV International Congress of Virology
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター(札幌)
    • Year and Date
      2011-09-13
  • [Presentation] The mutations in P3 and P3N-PIPO of Clover yellow vein virus affect resisntance breaking in pea2011

    • Author(s)
      Choi, SH
    • Organizer
      IUMS, XV International Congress of Virology
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター(札幌)
    • Year and Date
      2011-09-13

URL: 

Published: 2013-06-26  

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