2020 Fiscal Year Research-status Report
尿路結石マトリックス蛋白オステオポンチンを標的としたマクロファージ貪食機序の解明
Project/Area Number |
20K09562
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Research Institution | Nagoya City University |
Principal Investigator |
岡田 淳志 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (70444966)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田口 和己 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (00595184)
郡 健二郎 名古屋市立大学, その他部局等, 学長 (30122047)
安藤 亮介 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (30381867)
松永 民秀 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 教授 (40209581)
安井 孝周 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (40326153)
濱本 周造 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (80551267)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | 尿路結石 / マクロファージ / 貪食 / 結晶溶解 / オステオポンチン / 化合物ライブラリー |
Outline of Annual Research Achievements |
[1] 培養マクロファージ(Mφ)を用いたM1/M2Mφ結晶貪食解析法の確立 ① 培養Mφを用いたM1/M2誘導による貪食解析 申請時の計画では、ヒト由来Mφ細胞株を用いて炎症性Mφ(M1)/抗炎症性Mφ(M2)に分化させシュウ酸カルシウム1水和物(COM)結晶の貪食解析研究を行う予定であったが、継代培養を行えるヒト細胞株が存在しないことが判明し、マウス培養細胞に変更した。マウス培養Mφを、IFN-γ投与でM1に、IL-4投与でM2に分化させ、イメージングサイトメーターInCell Analyzer 6000を用いた蛍光標識シュウ酸カルシウム一水和物(f-COM)結晶の貪食試験を行った。貪食能の定量化は良好なデータを得られたが、予想に反しIFN-γ・IL-4投与によってf-COM結晶貪食率に明確な差異は得られなかった。現在その原因を探索中である。 ② 既存薬ライブラリーによる貪食能の亢進薬の選出 既存薬ライブラリー FDA-approved Drug Library (384-well)-L1300を用い、マウスMφのf-COM結晶の貪食能を亢進させる薬剤を探索するための研究である。約2600種類の既存薬ライブラリーのリストから、PubMedで「Kidney stone」のキーワードで文献を抽出し得た約800種類の薬剤を選出し、一次スクリーニングを開始した。正確な結晶貪食を確認するため、全自動生細胞イメージング解析システム IncuCyteを用いた解析法を導入した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
M1/M2への培養マクロファージの分化は予定通りには貪食率の変化を捉えられなかったが、正確な貪食率解析のため、InCell Analyzerによる解析からIncuCyteによるより正確な解析方法を確立した。 また最も難易度が高いと想定していた既存薬ライブラリーの導入と解析を、専属研究者を雇用することで解決した。
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Strategy for Future Research Activity |
[1]既存薬ライブラリーによる貪食能変化についての解析を継続する。 [2]OPN欠損マウスを用いたマクロファージ分布解析・貪食解析として、OPN添加f-COM結晶のMφ貪食試験と、OPN欠損マウスの腎結晶・Mφを用いた貪食解析を開始する。 [3] ヒトiPS細胞由来Mφを用いた腎結石貪食解析として、ヒトiPS細胞由来MφのM1/M2への分化誘導とf-COM結晶貪食解析、ならびにヒトiPS細胞由来Mφの腎結石の貪食解析と貪食促進薬の効果判定を行っていく。
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Causes of Carryover |
培養Mφを用いたM1/M2マクロファージ結晶貪食解析法の確立をする計画であった。計画自体は順調な滑り出しであったがCOVID-19による通常の医療業務が大幅に変更となり、予定してていた研究を進めることができなかった。このため次年度使用が生じた。次年度は残した計画を実施し、次の計画「オステオポンチン(OPN)欠損マウスを用いたマクロファージ分布解析・貪食解析」を進めて行きたい。
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Research Products
(57 results)
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[Presentation] M2 macrophages differentiated from iPS cells have higher abilities to phagocytose and process calcium oxalate crystals than similarly induced M1 macrophages2020
Author(s)
Okada Atsushi, Aoki Hiromasa, Onozato Daichi, Kato Taiki, Takase Hiroshi, Ohshima Shigeru, Banno Rika, Taguchi Kazumi, Hashita Tadahiro, Matsunaga Tamihide, Kohri Kenjiro, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Usefulness of determination of renal puncture line in ECIRS using Virtual Reality2020
Author(s)
Okada Atsushi , Noda Yusuke, Ohashi Kazuya, Okada Tomoki, Chaya Ryosuke, Kawase Kengo, Kato Taiki, Taguchi Kazumi, Hamamoto Shuzo, Hirose Yasujiro, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Impact of insulin resistance and physical activity on kidney stone formation in the Japanese population: A prospective cohort study2020
Author(s)
Ando Ryosuke, Suzuki Sadao, Nishiyama Takeshi, Nakagawa Hiroko,Hosono Akihiro, Watanabe Miki, Yamada Tamaki, Taguchi Kazumi, Hamamoto Shuzo, Okada Atsushi, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro,Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] The importance of hands-on training for flexible ureteroscope (fURS): Appropriate training as examined based on questionnaires2020
Author(s)
Hamamoto Shuzo, Okada Shinsuke, Inoue Takaaki, Okada Tomoki, Chaya Ryosuke, Kawase Kengo, Taguchi Kazumi, Okada Atsushi, Miura Hiroyasu, Matsuda Tadashi, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Prospective evaluation of endoscopic findings and analyses of the risk factors for ureteral changes during URSL2020
Author(s)
Hamamoto Shuzo, Okada Shinsuke, Inoue Takaaki, Okada Tomoki, Chaya Ryosuke, Kawase Kengo, Taguchi Kazumi, Okada Atsushi, Miura Hiroyasu, Matsuda Tadashi, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Investigation of the ideal position for endoscopic combined intrarenal surgery: Prone split-leg position vs. modified Valdivia position2020
Author(s)
Hamamoto Shuzo, Okada Shinsuke, Inoue Takaaki, Okada Tomoki, Chaya Ryosuke, Kawase Kengo, Taguchi Kazumi, Okada Atsushi, Miura Hiroyasu, Matsuda Tadashi, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Impact of preoperative ureteral stenting on endoscopic findings: A propensity score matching analysis2020
Author(s)
Hamamoto Shuzo, Okada Shinsuke, Inoue Takaaki, Okada Tomoki, Chaya Ryosuke, Kawase Kengo, Taguchi Kazumi, Okada Atsushi, Miura Hiroyasu, Matsuda Tadashi, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Fatty acid binding protein 4 drives calcification in the development of kidney stone disease2020
Author(s)
Taguchi Kazumi, Chen Ling, Hamamoto Shuzo, Sugino Teruaki, Kang Misun, Unno Rei, Benjamin A Sherer, Manint Usawachintachit, David T Tzou, Okada Atsushi, Sunita P Ho, Marshall L Stoller, Yasui Takahiro , and Thomas Chi
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Robotic-assisted fluoroscopic guidance provides more accurate and confident renal access than ultrasound guidance2020
Author(s)
Taguchi Kazumi, Okada Tomoki, Kawase Kengo, Sugino Teruaki, Tanaka Yutaro, Unno Rei, Kato Taiki, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Okada Atsushi, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Administration of antioxidants inhibits the development of renal crystals via Keap1/Nrf2 pathway2020
Author(s)
Unno Rei, Kawase Kengo, Sugino Teruaki, Tanaka Yutaro, Taguchi Kazumi, Unno Naoko, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Okada Atsushi, Nakane Akihiro, Kohri Kenjiro, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Surgical hand hygiene and febrile urinary tract infections in endourological surgery: a single-center prospective cohort study2020
Author(s)
Unno Rei, Taguchi Kazumi, Fuji Yasuhiro, Unno Naoko, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Okada Atsushi, Nakane Akihiro, Kamiya Hiroyuki, Kohri Kenjiro, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Brown adipocytes suppress kidney stone formation via heat-producing protein, uncoupling protein 12020
Author(s)
Sugino Teruaki, Okada Atsushi, Chaya Ryosuke, Tanaka Yutaro, Unno Rei, Taguchi Kazumi, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Mogami Tohru, Yamashita Hitoshi, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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[Presentation] Discovering spatial distribution and differential localization of protein matrix in calcium oxalate stones; A novel method of multifaceted structure analysis2020
Author(s)
Tanaka Yutaro, Okada Atsushi, Maruyama Mihoko, Tagiri Rie, Sugino Teruaki, Unno Rei, Taguchi Kazumi, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Yoshimura Masashi, Mori Yusuke, Kohri Kenjiro, Yasui Takahiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2020
Int'l Joint Research
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