2022 Fiscal Year Research-status Report
新奇酵素反応による細菌のプロテオスタシス制御：我々とは異質な酸化ストレス適応戦略
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20K15446
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| Research Institution | Hyogo Prefectural Institute of Technology |
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Principal Investigator |
今井 岳志 兵庫県立工業技術センター, その他部局等, 主任研究員 (30785241)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | バイオフィルム / ペルオキシダーゼ / 酸化還元 / 抗酸化 / ヘム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では各種の酸化ストレスに対して当該の酵素がどのような役割を果たすかを多角的に評価し、細菌の多様化に繋がった、我々とは異質な酸化ストレスへの適応戦略を明らかにすることを目指している．本研究計画は①酵素反応における当該酵素の諸性質解明、②オーソログの活性確認と破壊株作製、③破壊株においてタンパク質のアグリゲーションを定量、④進化生物学的な位置づけの解明、の４つの実施項目に分かれている．
今年度は特に①において当該酵素YjbIが活性中心に持つヘムがどのように持続的に抗酸化の役割を果たしているかという点に注目した．ヘムは大気中の酸素と結びつき、容易に周囲の分子を酸化するため、既知のヘムタンパク質を還元性の分子中に添加すると自動酸化が緩やかに進行する．そのため、同じくヘムタンパク質であるYjbIが自動酸化の性質を持っているならば、これまでに明らかにしてきた菌体表面の大気下で果たす抗酸化の役割と矛盾することになる．そこで、実際にいくつかの還元剤存在下でYjbIによる自動酸化を定量化してみた．その結果、他のヘムと比較して、YjbIが著しく自動酸化しづらいことが明らかとなった．これは、YjbIがこれまでに知られている典型的なヘムタンパク質に当てはまらない、特殊な仕組みを持つことやYjbIが生理機能として抗酸化反応を担っていることを裏付けるものとなった．機序の詳細は不明ではあるが、昨年度実施したポイントミューテーションの結果からその重要性が明らかとなった、活性中心付近のチロシン残基などの電子リッチな残基が、ヘム周辺に近づいた還元性の分子が酸化されることを防いでいる可能性がある．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
目標に掲げる当該酵素の諸性質解明に関連して、当該酵素の特殊な性質が明らかとなったため．また、トップジャーナルの1つにここまでの研究成果をまとめた投稿論文がアクセプトされたため、客観的にも順調に研究計画が進展していると考えている．
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き当該酵素による反応において未解明な、電子供与体の探索を試みる．
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| Causes of Carryover |
年度最終月の購入予定物品の一部で見積もりに時間がかかったため、翌月での使用となり次年度使用額となった．
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Research Products
(2 results)
