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2009 Fiscal Year Annual Research Report

タンパク質の動態と化学反応の同時計測可能な高速原子間力・蛍光顕微鏡の開発

Research Project

Project/Area Number 21681017
Research InstitutionKanazawa University

Principal Investigator

内橋 貴之  Kanazawa University, 数物科学系, 准教授 (30326300)

Keywords1分子イメージング / ナノ計測 / ナノプローブ / 蛍光顕微鏡
Research Abstract

本年度は、光学顕微鏡に搭載可能な高速AFMの要素技術を開発し、プロトタイプの製作とイメージングテストを行った。AFMと蛍光顕微鏡の同一視野観察を実現するためにはAFMに必要なカンチレバーの変位検出系をコンパクトにし、蛍光顕微鏡の光学系と干渉しないようにすることが必須である。現在の高速AFMでは幅1μm、長さ10μm程度の微小カンチレバーにレーザー光を反射させるために、光学顕微鏡用の対物レンズを用いて集光している。一方、試料ステージの裏面には高さ制御用のZ圧電体があるので、蛍光顕微鏡用の照明および検出用の光路を確保できない。この問題を克服するために、従来の試料を走査する方式からティップ走査型のスタンドアロン方式へAFMの動作機構を変更した。カンチレバーの動きにレーザー光の光路を追従させるために、ティップ走査用のピエゾに並列に光学レンズを搭載したピエゾを取り付け、光軸トラッキングを行った。これにより光軸を一定に保ったままティップを走査することが出来るようになった。また、高速AFM全体の設計を見直し、光学顕微鏡に搭載できるようAFM本体の小型化を実現した。
上記の設計により試作した高速AFMイメージングを行ったところ、イメージングは行えるが、予定していたイメージングレートを得られないことが判明した。これは、カンチレバーホルダーと試料との間に挟まれたある水によるダンピング効果によるZ圧電体変位の位相遅れによるものであると考えられ、カンチレバーホルダーの形状を再検討する必要があることが分かった。
来年度は高速AFMイメージング可能なように早急に問題を解決した後に、蛍光顕微鏡との同一視野観察の試験を行っていく予定である。

  • Research Products

    (10 results)

All 2010 2009

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (5 results) Book (3 results)

  • [Journal Article] High-speed atomic force microscopy techniques for observing dynamic biomolecular processes2010

    • Author(s)
      D.Yamamoto, T.Uchihashi, N.Kodera, H.Yamashita, S.Nishikori, T.Ogura, M.Shibata, T.Ando
    • Journal Title

      Methods in Enzymology (in press)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] High-speed atomic force microscopy shows dynamic molecular processes in photo-activated bacteriorhodopsin2010

    • Author(s)
      M.Shibata, H.Yamashita, T.Uchihashi, H.Kandori, T.Ando
    • Journal Title

      Nature Nanotechnology 5

      Pages: 208-212

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 高速AFMによるバイオ分子の液中動的観察2010

    • Author(s)
      内橋貴之
    • Organizer
      日本顕微鏡学会 第34回関東支部講演会
    • Place of Presentation
      帝京大学医学部(東京都)
    • Year and Date
      2010-03-20
  • [Presentation] 高速原子間力顕微鏡による生体分子のダイナミクス観察~現状と将来展望~2009

    • Author(s)
      内橋貴之
    • Organizer
      ナノプローブテクノロジー第167委員会 第56回研究会
    • Place of Presentation
      (独)情報通信研究機構本部(東京都)
    • Year and Date
      2009-11-10
  • [Presentation] 高速AFMイメージング技術で視る生体分子の機能動態2009

    • Author(s)
      内橋貴之
    • Organizer
      第20回化学とマイクロ・ナノシステム研究会・ISMM2009
    • Place of Presentation
      金沢エクセルホテル東急(石川県)
    • Year and Date
      2009-11-09
  • [Presentation] Direct Visualization of Protein Dynamics using High-Speed AFM2009

    • Author(s)
      内橋貴之
    • Organizer
      International Symposium on Innovative Nanoscience of Supermolecular Motor Proteins Working in Biomembranes
    • Place of Presentation
      京都大学芝蘭会館(京都府)
    • Year and Date
      2009-09-08
  • [Presentation] 高速AFMによる生体分子のナノダイナミクス計測2009

    • Author(s)
      内橋貴之
    • Organizer
      第9回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      本全日空ホテルニュースカイ(熊本県)
    • Year and Date
      2009-05-22
  • [Book] Life at the Nanoscale : Atomic Force Microscopy of Live Cells2010

    • Author(s)
      T.Uchihashi, T.Ando
    • Publisher
      Pan Stanford Publishing(in press)
  • [Book] Atomic Force Microscopy : its use in Biomedical Researches2010

    • Author(s)
      T.Uchihashi, T.Ando
    • Publisher
      Humana Press(in press)
  • [Book] 酵素活用ハンドブック2010

    • Author(s)
      内橋貴之、安藤敏夫
    • Publisher
      NTS(印刷中)

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Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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