2009 Fiscal Year Annual Research Report
神経幹細胞から特異的ニューロン・グリア細胞を産み出すメカニズムの解析と応用
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21790183
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
竹林 浩秀 Kumamoto University, 大学院・生命科学研究部, 准教授 (60353439)
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| Keywords | 運動ニューロン / オリゴデンドロサイト / 転写因子 / Olig / エレクトロポレーション / 神経細胞 / グリア細胞 / 神経幹細胞 |
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| Research Abstract |
神経幹細胞は胎児期および成体の脳内で自己複製をしながら、ニューロンやグリア細胞を産み出す。Olig2は、胎児期の腹側脊髄に発現し、運動ニューロンとオリゴデンドロサイト前駆細胞の発生に必須の転写因子である(Ono et al. Mol Cells 2009)。平成21年度は、GST-Olig2融合タンパクを用いて、ラット脳ライセートからOlig2に結合する候補因子をマススペクロメトリーにて多数同定した。さらに、これらの候補因子の胎生期脊髄における発現パターンをin situhybridization法にて調べ、pMNドメインとの共発現がみられるかどうか、また、ニューロン産生期あるいはグリア産生期に共発現するのかについて詳細に解析した。Olig2と共発現を示し、タンパクの一次構造などから転写に関わっていることが示唆される因子について、タグ付き発現ベクターを構築し、免疫沈降法によりOlig2結合部位の同定を試みている。さらに、ニワトリ胚やマウス胚にエレクトロポレーション法により遺伝子導入を行い、運動ニューロンやオリゴデンドロサイトの発生・分化に対する影響を調べている。平成22年度は、shRNAコンストラクトを作製、あるいは、ドミナントネガティブ体を作製し、これらのコンストラクトをニワトリ胚やマウス胚に遺伝子導入することにより機能抑制実験を行う予定である。
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