2010 Fiscal Year Annual Research Report
p53,TIGARを介した心筋代謝制御による心不全治療の研究
Project/Area Number |
21890224
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Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
Principal Investigator |
木股 正樹 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教 (20548440)
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Keywords | 心不全 / p53 / ミトコンドリア / エネルギー代謝 / TIGAR |
Research Abstract |
1): p53,TIGARの発現または抑制による、心筋細胞の代謝、細胞死の制御。すでにp53抑制薬 (pifithrin-α)、誘導薬(Nutlin-3, Quinaqulin)による発現調節や、siRNAによるp53,TIGARのノックダウン、アデノウイルスを用いたp53,TIGARの発現モデルを確立した。これらの調節の下に、脂肪酸代謝については[^<14>C]palmitate、糖代謝は、2-deoxy-D-[^<14>C]glucose tracerを用いて、代謝変化の詳細な検討を行い、クラーク型酸素濃度計を用いた酸素消費量の検討、ミトコンドリア呼吸鎖(ComplexI,II,III,IV)の機能、p53、細胞死関連タンパク発現解析、アポトーシス、オートファジーの変化、電子顕微鏡を用いたミトコンドリア超微形態や細胞内脂質蓄積の検討し、論文発表した。 (2): p53,TIGARの遺伝子改変マウスを用いた心不全モデルでのエネルギー代謝、心機能、予後解析。 p53ノックアウトマウスを用いて、(1)エネルギー供給障害モデル(心筋梗塞モデル)(2)エネルギー利用障害モデル(糖尿病性心筋症モデル、アドリアマイシン心筋症モデル)(3)エネルギー過消費モデルとしての肥大心モデル(胸部大動脈狭窄モデル)を作製した。経時的に心臓超音波検査にて心機能を評価し、心不全初期、中期、後期における左心機能をミラーカテーテルにて計測後、心臓を摘出し免疫染色、ウエスタンブロットによる経時的なタンパク発現の検討、糖代謝関連酵素活性の測定、高速液体クロマトグラフィーを用いた高エネルギーリン酸化合物測定、ミトコンドリアを抽出しての酸素消費測定を進めている。TIGARノックアウトマウス(全身、心臓特異的)を作製したので、これらの遺伝子改変マウスを用いて、上記心不全モデルについて検討することで、不全心におけるエネルギー代謝異常が、心機能や予後に及ぼす影響について検討を進めている。
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Research Products
(8 results)