2021 Fiscal Year Research-status Report
Elucidation of the NK cell immune escape mechanism using iPS cell-derived platelets and development of treatment
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21K08413
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
杉本 直志 京都大学, iPS細胞研究所, 特定拠点講師 (10447956)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 血小板 / HLAクラスI / NK細胞 / 免疫抑制分子 / プロテオミック解析 / ライブ動態解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
高度の血小板減少症では重篤な出血の予防や治療のために献血血小板の輸血が行われるが、血小板のHLAクラスI（HLA-I）に対する同種抗体によって輸血患者の約5％では拒絶されてしまう。この様な血小板輸血不応症に対するユニバーサルな対策法としてHLA-I欠失血小板の開発が進んでおり、申請者は臨床製造が可能なiPS細胞由来血小板（iPS血小板）システムを用いてHLA-I欠失血小板を製造した。免疫原性の検証を行ったところ、他のHLA-I欠失細胞と異なり血小板はNK細胞に攻撃されないことを見出したが、その機序は不明であった。そこで本研究では、ヒト血小板が保持するHLA分子の有無とは独立したNK細胞に対する免疫逃避メカニズムを解明することを目的としている。
令和3年度はiPS血小板とその母細胞である巨核球株imMKCLとのプロテオミックス解析を2セット行った。そうして得られた発現プロフィールのバイオインフォマティック解析を行ったところ、iPS血小板により高発現する免疫抑制性分子を複数同定できた。これらの分子が血小板の免疫逃避性に寄与している可能性が考えられ、阻害抗体や阻害化合物等を用いたインビトロ共培養実験で機能検証を進めた。
NK細胞とiPS細胞由来血小板およびimMKCLとの相互作用を観察するライブ動態解析では、特異的な相互作用が示唆される一定のデータを取得できた。しかしながら血小板を活性化させずに固定することが容易では無く、その条件をつめてより信頼性のあるデータの取得に努めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
iPS血小板とimMKCLのプロテオミックス解析では、得られた発現プロフィールのバイオインフォマティック解析を経て、iPS血小板に高発現する免疫抑制性分子を複数同定できており、さらに一部候補分子の機能検証まで進めており順調以上の進捗である。
一方、NK細胞とiPS細胞由来血小板およびimMKCLを観察するライブ動態解析では、特異的な相互作用が示唆される一定のデータを取得できた。しかしながら、血小板を活性化させずに固定することが容易では無く、その条件をつめてより信頼性のあるデータの取得に努めており、まだ十分に完了しておらず、進捗目標からやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
ライブ動態解析を確実なものとして、既知を含む、血小板の免疫逃避性に寄与する候補分子のリストアップを完了させ、候補分子の機能検証を進める。また巨大血小板の作出に着手し、通常のiPS血小板との比較を進める。さらに血小板とNK細胞の免疫応答のビボ検証のため、NK細胞までが十分構築されたヒト免疫系再構築マウスを用いた循環検証において、候補分子の寄与を阻害抗体などを用いて検証をする。
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