2010 Fiscal Year Annual Research Report
化学品製造のために生体触媒利用技術を飛躍的にシンプル化するための基盤技術開発
| Project/Area Number |
22360343
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
大竹 久夫 大阪大学, 工学研究科, 教授 (10127483)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
本田 孝祐 大阪大学, 工学研究科, 助教 (90403162)
|
|---|
| Keywords | 耐熱性酵素 / 合成代謝工学 / 疎水性細菌 |
|---|
| Research Abstract |
超好熱菌の耐熱性酵素遺伝子を発現した大腸菌や疎水性放線菌Rhodococcus opoacus B-4株の加熱処理細胞を用いて、glycerolからglycerol-3-phosphate、fructose 1,6-bisphosphateから2-deoxyribose-5-phosphate、2,2,2-trifluoroacetophenoneからα-(trifluoromethyl)-benzyl akoholなどが合成できることを確かめた。glycerolからのglycerol-3-phosphate(G3P)の生産には、PPKTによるpolyphosphate (polyP)とADPからのATP再生系を共役させた。これにより、高価なATPを多量に消費することなく、安価なpolyPからのリン酸基の供給を実現するとともに、高濃度のATPやADPの蓄積による酵素活性の阻害を避けることができた。2,2,2-trifluoroacetophenoneからのα-(trifluoromethyl)-benzyl alcoholの合成では、原料および生成物とも疎水性が高く水には溶けないことから、有機溶媒中で合成反応を行った。そのため、芳香族ケトンに作用する耐熱性のcarbonyl reductase (ADHT)を疎水性放線菌R.opacus B-4株で発現させた。R.opacus B-4株の形質転換体を加熱処理することによりADHTのみの酵素活性を有する死滅菌体を得た。R.opacus B-4株は細胞表層の疎水性が高く有機溶媒に良く懸濁するから、死滅菌体を直接原料の2,2,2-trifluoroacetophenoneに懸濁し合成反応を行わせることができた。
|
-
-
[Journal Article] Production of 2-deoxyribose 5-phosphate from fructose to demonstrate a potential or artificial bio-synthetic pathway using thermophilic enzymes.2010
Author(s)
Honda, K., Maya, S., Omasa, T., Hirota, R., Kuroda, A., Ohtake, H.
-
Journal Title
J.Biotechnol.
Volume: 148
Pages: 204-207
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Electron microscopic analysis of heat-induced leakage of polyphosphate from a phoU mutant of Escherichia coli.2010
Author(s)
Kashihara, H., Kang, B.M., Omasa, T., Honda, K., Sameshima, Y., Kuroda, A., Ohtake, H.
-
Journal Title
Biosci.Biotechnol.Biochem.
Volume: 74
Pages: 865-868
Peer Reviewed
-
