2010 Fiscal Year Annual Research Report
藻類における雌雄非対称性の成立とオルガネラ遺伝の方向を決める形態と構造の探索
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22370024
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
河野 重行 東京大学, 大学院・新領域創成科学研究科, 教授 (70161338)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
本村 泰三 北海道大学, 北方生物圏フィールド科学センター, 教授 (30183974)
宮村 新一 筑波大学, 生命環境科学研究科, 准教授 (00192766)
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| Keywords | ヒラアオノリ / 雌雄非対称性 / マイクロサテライト / 眼点 / 接合装置 / FE-SEM / 凍結乾燥法 / 免疫サブトラクション |
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| Research Abstract |
免疫サブトラクション法の再現性を検討するとともに、正逆のサブトラクションで、雄(♂)の接合装置に特異的な抗体の調製に挑戦した。
1.ヒラアオノリの培養系統をさらに増やし、配偶子の大小が真正の性的二形性なのか単なる地域差なのかを解析した。系統関係を明瞭にするためにマイクロサテライトマーカーとオルガネラDNAマーカーを単離した。マイクロサテライトに関してはSNXリンカー・オリゴプローブ法で単離することに成功しているし、葉緑体とミトコンドリアもゲノム配列が公開されているアオサ藻網の近縁種の遺伝子配置を参照し、PCR-RFLPで識別できるDNAマーカーを得ることができた。
2.免疫サブトラクション法で配偶子の細胞表層に接合装置の性的二形性を検出している。ウェスタンブロット解析から、免疫サブトラクション法の抗原となっているタンパク質は、250kDaと80kDaと推測している。免疫サブトラクション法の再現性を調査すると同時に、雌(♀)ではなく、雄(♂)の接合装置を認識する抗体を調製した。また、抗原タンパク質とその遺伝子を同定するために、発現cDNAクローンライブラリーを構築した。北大グループと共同で野外採集した配偶体から放出された褐藻の配偶子を使うことを検討している。
3.FE-SEMは、試料の乾燥法を工夫することで、眼点や接合装置など細胞表層からでは識別が難しい構造を観察できるようにした。今回は、「凍結乾燥法」を工夫して、雌(♀)の接合装置に特異な顆粒状の構造を観察できるようにした。透過電顕も用いることで、雄(♂)の表層や接合装置に何か特異的な構造が観察できることを試しているところである。一方、FE-SEM免疫電顕に関しては、筑波大グループと共同で、サブトラクション法で調製した抗体が細胞表層の接合装置の何を認識しているかを調べていて、光学顕微鏡による免疫染色の解析が進んでいる。
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[Journal Article] Chlamydomonas reinhardtii : Duration of its cell cycle and phases at growth rates affected by light intensity2011
Author(s)
Vitova, M., Bisova, K., Umysova, D., Hlavova, M., Kawano, S., Zachleder, V., Cizkova, M.
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Journal Title
Planta
Volume: 233
Pages: 75-86
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] DNA Packaging Proteins Glom and Glom2 Coordinately Organize the Mitochondrial Nucleoid of Physarum polycephalum.2011
Author(s)
Itoh, K., Izumi, A, Mori, T., Dohmae, N., Yui, R., Maeda-Sano, K., Shirai, Y, Kanaoka, M.M., Kuroiwa, T., Higashiyama, T., Sugita, M., Murakami-Murofushi, K., Kawano, S., Sasaki, N.
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Journal Title
Mitochondria
Volume: 11((印刷中)掲載確定)
Peer Reviewed
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[Journal Article] Two separate pathways including SICLV1, SISTM and SICUC that control carpel development in a bisexual mutant of Silene latifolia.2010
Author(s)
Koizumi, A., Yamanaka, K., Nishihara, N., Kazama, Y., Abe, T., Kawano, S.
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Journal Title
Plant Cell Physiol.
Volume: 51
Pages: 282-293
Peer Reviewed
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[Journal Article] Analysis of BAC clones containing homologous sequences on the end of the Xq arm and on chromosome 7 in the dioecious plant Silene latifolia.2010
Author(s)
Ishii, K., Amanai, Y., Kazama, Y., Ikeda, M., Kamada, H., Kawano, S.
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Journal Title
Genome
Volume: 53
Pages: 311-320
Peer Reviewed
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[Journal Article] Chloroplasts divide by contraction of a bundle of nanofilaments consisting of polyglucan.2010
Author(s)
Yoshida, Y., Kuroiwa, H., Misumi, O., Yoshida, M., Ohnuma, M., Fujiwara, T., Yagisawa, F., Hirooka, S., Imoto, Y., Matsushita, K., Kawano, S., Kuroiwa, T.
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Journal Title
Science
Volume: 329
Pages: 949-953
Peer Reviewed
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[Journal Article] Isolation of chloroplast FtsZ and AtpC, and analysis of protein targeting into the complex chloroplast of the haptophyte Pavlova pinguis.2010
Author(s)
Nishikawa, T., Kajitani, H., Sato, M., Mogi, Y., Moriyama, Y., Kawano, S.
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Journal Title
Cytologia
Volume: 75
Pages: 203-210
Peer Reviewed
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[Journal Article] Sex chromosome evolution revealed by physical mapping of SIAP3X/Y in the dioecious plant Silene latifolia.2010
Author(s)
Nishiyama, R., Ishii, K., Kifune, E., Kazama, Y., Nishihara, K., Matsunaga, S., Shinozaki.K., Kawano, S.
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Journal Title
Cytologia
Volume: 75
Pages: 319-325
Peer Reviewed
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