2012 Fiscal Year Annual Research Report
南九州の放牧牛における膵姪類の簡易診断法の開発と疫学調査
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22580351
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
野中 成晃 宮崎大学, 農学部, 准教授 (50281853)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀井 洋一郎 宮崎大学, 農学部, 教授 (80173623)
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| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | 膵蛭 / 小型膵蛭 / 形態 / DNA / 分布 / 診断 / 疫学 / PCR |
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| Research Abstract |
膵蛭と小形膵蛭の種の独立性を遺伝学的に評価し、形態学的な差異との関連性を解析した。東京都港区、島根県大田市、沖縄県石垣市、ブラジル、ベトナムの屠場で採取した虫体計125検体について、核ITS2とミトコンドリアCO1遺伝子のPCR、塩基配列解読を行ったところ、103検体で両領域の配列が得られた。系統樹解析では、両領域ともに2つのメインクレード（ITS2：α、β；CO1：a、b）に分かれ、69検体および33検体がα-a（遺伝子型A）およびβ-b（遺伝子型B）の組み合わせに含まれた。これらの虫体について、形態分類に利用される体長、体幅、口吸盤径/腹吸盤径比、精巣分葉、卵巣分葉の5項目について評価したところ、遺伝子型Aは48/69（69.6%）において４項目以上で膵蛭の、遺伝子型Bは7/33（21.2%）において４項目以上で小型膵蛭の特徴を示し、遺伝子型Aは膵蛭、遺伝子型Bは小形膵蛭であると考えられた。しかし、残りは形態学的に鑑別できない虫体であった。このことから、膵蛭と小形膵蛭は遺伝学的に区別できるものの、形態学的には完全な区別が困難であることがわかった。また、牛の産地を感染場所と考えると、島根県、九州内部からは膵蛭のみが、沖縄県本島・鹿児島県徳之島では小形膵蛭のみが、沖縄県八重山諸島では両種が分布すると推測され、2種の分布には地域的な偏りが存在すると考えられた。
虫卵排出牛13頭に対してプラジカンテル（25mg/kgおよび50mg/kgの１回経口投与）による駆虫試験を実施した結果、全頭で投与後7日以内に糞便内虫卵が陰転し、本法で駆虫が可能であることがわかった。
また、糞便内抗原検出法の開発を目的に、虫体粗抗原およびES抗原に対するウサギ抗体を作成し、サンドイッチELISAの各種条件設定を行った結果、粗抗原0.5ngを検出できるassay系を開発することができた。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(6 results)
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[Presentation] 食肉由来寄生虫症2013
Author(s)
野中成晃
Organizer
平成24年度宮崎県食肉衛生検査所協議会研修会
Place of Presentation
宮崎県総合保健センター（宮崎県）
Year and Date
20130202-20130202
Invited
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