インフルエンザウイルスのエンドヌクレアーゼに対する阻害薬の探索

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22590422
• Research Institution: Tokushima Bunri University
• Principal Investigator: 葛原 隆 徳島文理大学, 薬学部, 教授 (00260513)
• Keywords: インフルエンザ / RNAポリメラーゼ / エンドヌクレアーゼ / 阻害剤 / サリドマイド / フェネチルフェニルフサリミド / 天然物化合物 / カテキン

Research Abstract

抗インフルエンザ薬として用いられているものはタミフル、リレンザなどのノイラミニダーゼ阻害薬が主なものであり、耐性ウイルスの出現や、副作用の可能性などの問題がある。ノイラミニダーゼ以外のウイルスの標的とする薬を見いだすことを考え、ウイルス株間で保存性の高い、インフルエンザウイルスRNAポリメラーゼを解析し、これに対する阻害剤を探索した。特にインフルエンザウイルスのエンドヌクレアーゼ阻害活性を指標に化合物のスクリーニングを行い、抗インフルエンザ薬を探索した。1)インフルエンザRNAポリメラーゼのエンドヌクレアーゼドメインタンパク質を精製し、その活性の最適条件を検討し、基質の最適化など、生化学的な性状を解析した。2)サリドマイドアナログ化合物によるインフルエンザ・エンドヌクレアーゼ阻害薬を探索した。サリドマイドは現在は多発性骨髄腫の治療薬などとして用いられている。サリドマイドは様々な酵素に作用することが明らかになってきている。このサリドマイドを基にした多数のアナログが抗インフルエンザ薬などの他の薬として用いることができるというアイデアを申請者は考えた。連携研究者である橋本祐一氏は、多数のサリドマイドアナログを有機化学的に合成している。それらの他種類のサリドマイドアナログに対して、エンドヌクレアーゼ阻害活性を検定し探索したところ、複数の候補化合物を得た。3)緑茶カテキンがこのエンドヌクレアーゼ活性を阻害することを見いだした。4)立体構造からコンピュータシミュレーションを利用した結合化合物の予測によるインフルエンザ・エンドヌクレアーゼ阻害薬を探索した。

Research Products

• [Journal Article] Anti-influenza Activity of Phenethylphenylphthalimide Analogs Derived from Thalidomide. (2010)
  • Author(s): Iwai Y, Takahashi H, Hatakeyama D, Motoshima K, Ishikawa M, Sugita K, Hashimoto Y, Harada Y, Itamura S, Odagiri T, Tashiro M, Sei Y, Yamaguchi K, Kuzuhara T.
  • Journal Title: Bioorganic & Medicinal Chemistry Volume: 18 Pages: 5379-5390
  • DOI: doi:10.1016/j.bmc.2010.05.035.
• [Journal Article] New role of(-)-epicatechin in enhancing the induction of growth inhibition and apoptosis in human lung cancer cells by curcumin (2010)
  • Author(s): Saha A, Kuzuhara T, Echigo N, Suganuma M, Fujiki H.
  • Journal Title: Cancer Prevention Research Volume: 3 Pages: 953-962
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Apoptosis of human lung cancer cells by curcumin mediated through up-regulation of growth arrest and DNA damage inducible genes 45 and 153 (2010)
  • Author(s): Saha A, Kuzuhara T, Echigo N, Fujii A, Suganuma M, Fujiki H
  • Journal Title: Biol.Pharm.Bull. Volume: 33 Pages: 1291-1299
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Bioactivity guided isolation of anticancer constituents from leaves of Alnus sieboldiana(Betulaceae). (2010)
  • Author(s): Ludwiczuk, A, Saha, A, Kuzuhara, T, Asakawa Y.
  • Journal Title: Phytomedicine Volume: 18 Pages: 491-498
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Design and synthesis of resin-conjugated Tamiflu analogs for affinity chromatography. (2010)
  • Author(s): Kimura Y, Yamatsugu K, Kanai M, Echigo N, Kuzuhara T, Shibasaki M.
  • Journal Title: Bull.Korean Chem.Soc. Volume: 31 Pages: 588-591
  • Peer Reviewed
• [Presentation] オセルタミビル固定担体を用いた脳におけるオセルタミビル結合タンパク質の探索 (2011)
  • Author(s): 越後典子、正木智久、力武舞、磯田裕美子、木村康明、金井求、柴崎正勝、葛原隆
  • Organizer: 第131回日本薬学会年会
  • Place of Presentation: 静岡県静岡市
  • Year and Date: 20110328-20110331
• [Presentation] サリドマイド由来誘導体による抗インフルエンザ活性 (2011)
  • Author(s): 岩井佑磨、高橋仁、畠山大、本島和典、石川稔、杉田和幸、橋本祐一、原田勇一、板村繁之、小田切孝人、田代眞人、清悦久、山口健太郎、葛原隆
  • Organizer: 第131回日本薬学会年会
  • Place of Presentation: 静岡県静岡市
  • Year and Date: 20110328-20110331
• [Presentation] Thalidomide analogs as a new strategy against influenza A (2010)
  • Author(s): Hatakeyama D, Iwai Y, Takahashi H, Motoshima K, Ishikawa M, Sugita K, Hashimoto Y, Harada Y, Itamura S, Odagiri T, Tashiro M, Sei Y, Yamaguchi K, Kuzuhara T
  • Organizer: Cell Symposia"Influenza Translating basic insights"
  • Place of Presentation: Washington D.C., USA
  • Year and Date: 20101202-20101204
• [Presentation] サリドマイド由来誘導体による抗インフルエンザウイルス活性の構造学的および生化学的解析 (2010)
  • Author(s): 畠山大, 岩井佑磨, 高橋仁, 本島和典, 石川稔, 杉田和幸, 橋本祐一, 原田勇一, 板村繁之, 小田切孝人, 田代眞人, 清悦久, 山口健太郎, 葛原隆
  • Organizer: 第49回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会中国四国支部学術大会
  • Place of Presentation: 鳥取県米子市
  • Year and Date: 20101106-20101107
• [Presentation] サリドマイド・アナログの抗インフルエンザウイルス活性 (2010)
  • Author(s): 畠山大, 岩井佑磨, 高橋仁, 本島和典, 石川稔, 杉田和幸, 橋本祐一, 原田勇一, 板村繁之, 小田切孝人, 田代眞人, 清悦久, 山口健太郎, 葛原隆
  • Organizer: 日本生物物理学会第48回年会
  • Place of Presentation: 東北大学川内キャンパス
  • Year and Date: 20100920-20100922
• [Presentation] タミフル固定担体を用いた脳におけるタミフル結合タンパク質の探索 (2010)
  • Author(s): 越後典子、正木智久、力武舞、磯田裕美子、葛原隆、木村康明、金井求、柴崎正勝
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] インフルエンザウイルスRNAポリメラーゼの解析のためのPA、PB1、PB2全長の昆虫細胞での発現系構築 (2010)
  • Author(s): 加集美穂、森田悠香、越後典子、葛原隆
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] インフルエンザRNAポリメラーゼPB2と核内輸送タンパク質Importinによる複合体の結晶構造解析 (2010)
  • Author(s): 中野亜美、木瀬大輔、葛原隆、津下英明
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] インフルエンザRNA合成酵素の大腸菌によるタンパク発現及び機能解析 (2010)
  • Author(s): 廣田丈典、畠山大、葛原隆
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] インフルエンザウイルスRNA依存性RNAポリメラーゼのHEK293T細胞における過剰発現の効果の解析 (2010)
  • Author(s): 岡田行正、越後典子、葛原隆
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] マルカンチンによる抗インフルエンザ活性 (2010)
  • Author(s): 岩井佑磨、奥谷武史、越後典子、葛原隆、村上宏起、五味康行、奥野良信、石川豊数、橋本敏広、浅川義範
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] 新しい抗インフルエンザ薬としてのサリドマイド由来誘導体 (2010)
  • Author(s): 畠山大、岩井佑磨、葛原隆、高橋仁、原田勇一、板村繁之、小田切孝人、田代眞人、本島和典、石川稔、杉田和幸、橋本祐一、清悦久、山口健太郎
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] ミツバチ失踪の原因と考えられるウイルス構成タンパク質の構造解析 (2010)
  • Author(s): 西園寺花恋、木村若菜、渡邊真衣、河野良造、竹田裕文、畠山大、葛原隆
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] 阿波番茶に含まれる成分の精製とその生理作用検討 (2010)
  • Author(s): 仁木健悟、黒河愛美、太田佳奈、畠山大、越後典子、葛原隆、江角朋之
  • Organizer: 文部科学省戦略的研究基盤形成支援事業「疾患関連遺伝子及び疾患治療に用いる天然有機化合物の生合成遺伝子の包括的解析」第1回研究発表会
  • Place of Presentation: 徳島文理大学
  • Year and Date: 2010-12-22
• [Presentation] サリドマイド由来誘導体の抗インフルエンザ活性 (2010)
  • Author(s): 畠山大, 岩井佑磨, 高橋仁, 本島和典, 石川稔, 杉田和幸, 橋本祐一, 原田勇一, 板村繁之, 小田切孝人, 田代眞人, 清悦久, 山口健太郎, 葛原隆
  • Organizer: 日本生物物理学会第2回中国四国支部大会
  • Place of Presentation: 松山大学薬学部
  • Year and Date: 2010-05-08
• [Remarks]
  • URL: http://p.bunri-u.ac.jp/lab/labO8/
• [Remarks]
  • URL: http://p.bunri-u.ac.jp/labO8/research.html