2010 Fiscal Year Annual Research Report
先天性徐脈発症機構の分子生物学的解明とこれに基づくバイオペースメーカー開発の研究
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22590806
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
林 研至 金沢大学, 附属病院, 助教 (00422642)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤野 陽 金沢大学, 保健学系, 准教授 (40361993)
倉田 康孝 金沢医科大学, 医学部, 准教授 (00267725)
山岸 正和 金沢大学, 医学系, 教授 (70393238)
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| Keywords | 循環器 / 遺伝子 / 再生医学 / シミュレーション工学 / 生理学 |
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| Research Abstract |
(1)若年発症および家族性徐脈症例のサンプル収集
先天性徐脈の発症機構を分子生物学的に解明するため、金沢大学病院を拠点として家族歴のある、あるいは若年発症(60歳未満)の先天性徐脈(洞不全症候群および心臓刺激伝導障害)症例53例のgenome DNAおよび臨床データを集積した。
(2)先天性徐脈の遺伝子変異検索および臨床像の把握
集積した先天性徐脈患者の末梢白血球よりリンパ球ゲノムDNAを抽出し、各々の遺伝子のエクソンをゲノムDNAからPCR法にて増幅し、SSCP法、またはHi-Res Melting法による遺伝子変異解析装置LightScanner(Idaho Technology社)でスクリーニングを行い、異常パターンを認めたサンプルについては、オートシーケンサーを用いて塩基配列異常を同定した。遺伝子解析の結果、4症例より5種類の遺伝子変異を同定した。これらのうち、イオンチャネル遺伝子に変異が認められた2種類の遺伝子変異(KCNH2 R269WおよびSCN5A P1824A)について、動物培養細胞を用いてパッチクランプ法による電気生理学的検討を行った。
(3)心筋前駆細胞(Cardiac progenitor cell,CPC)の単離・培養
新生仔ラット心筋細胞より心筋前駆細胞の単離・培養を試みた。培養細胞の中に一部自己拍動性の細胞群を認めた。また、心筋前駆細胞に対してパッチクランプ法を用いて細胞に発現しているイオン電流の計測を行った。
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