2023 Fiscal Year Research-status Report
Development of a simple, inexpensive, and highly sensitive on-site diagnosis system for African swine fever
| Project/Area Number |
22K05950
|
|---|
| Research Institution | Kyoto University |
|---|
Principal Investigator |
山崎 安子 京都大学, 東南アジア地域研究研究所, 研究員 (70867077)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山崎 渉 京都大学, 東南アジア地域研究研究所, 教授 (70393262)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| Keywords | アフリカ豚熱 / オンサイト診断 / ASF / POCT |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、研究代表者らが独自に開発した牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)診断システムを初めてアフリカ豚熱ウイルス(ASFV)に応用し、感染個体のオンサイト診断や野生イボイノシシ・水を含む環境サンプル中からの高感度・迅速ウイルス検出を実現することにより、ASF発生国での早期封じ込めを可能とし、世界の食肉の安定供給へ貢献することを目的としている。
2022年度はベトナムにおいて、ベトナム国立農業大学の協力のもと、ASFの迅速かつ高感度なポイントオブケア検査（POCT）を開発し、性能評価を実施した。このPOCTは、豚の全血を用いて、DNA抽出開始から最終判定まで最大50分で完了する。高価な設備や機器は不要であり、電池式の卓上遠心機およびヒートブロックを使用するため極めて低コストで実施できる。豚全血89検体について、評価した結果、従来のリアルタイムPCR法と比較して、検出感度は10倍低下したものの、診断的感度は100%(56/56)、診断的特異度も100%(33/33)と同等であった。
2023年度は、開発したPOCTをさらに応用し、ウイルス濃縮という観点を加え、より検出感度を高めた診断法の開発を試みた。ベトナムおよび日本の飼養豚のサンプルを採取し、その性能を評価したところ、ASFに自然感染した豚からASFVを従来のDNA抽出キットを使用した方法と比較して、リアルタイムPCR法およびLAMP法でより高感度に検出することが可能であった。
2024年度については、引き続きベトナムにおいて高感度なASFV検出法を環境サンプルについても検証するとともに、アジアで流行しているASFだけでなくASF常在国であるアフリカのタンザニアのASFについても、同様に開発したPOCTを活用できるかの実証実験を行う計画である。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ベトナムでのフィールド調査において、臨床サンプルからASFVを高感度に検出できる方法の開発を試み、良好な結果を得ることができた。環境サンプルの調査については2024年度も継続予定である。タンザニアでのフィールド調査についても、ベトナムでの評価が終了次第、実施する。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は、アジアで流行中のASFVだけでなく、ASF常在国であるアフリカのタンザニアの臨床サンプルや環境サンプルからもASFVが検出できるか開発した診断法の評価を行う。
|
| Causes of Carryover |
実験に必要な消耗品や試薬が想定より少なかったため次年度使用額が生じた。消耗品や試薬を順次購入し、さらなる実験の推進をおこなう。
|
Research Products
(2 results)
-
[Presentation] Development of a highly sensitive and cost-effective point-of-care test for African swine fever with loop-mediated isothermal amplification detection: evaluation using naturally infected swine whole blood samples from Vietnam2023
Author(s)
Mai Thi Ngan, Huynh Thi My Le, Vu Ngoc Dang, Trinh Thi Bich Ngoc, Le Van Phan, Nguyen Thi Hoa, Truong Quang Lam, Nguyen Thi Lan, Kosuke Notsu, Satoshi Sekiguchi, Yasuko Yamazaki, Wataru Yamazaki
Organizer
ISWAVLD2023 (International Symposium of the World Association of Veterinary Laboratory Diagnosis 2023)
Int'l Joint Research
-
