2022 Fiscal Year Research-status Report
リピートRNA封入体の形成・分解に関わる新規遺伝子の同定
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22K07525
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| Research Institution | Meiji Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
紀 嘉浩 明治薬科大学, 薬学部, 教授 (80415140)
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2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | リピート伸長疾患 / RNA foci / 筋強直性ジストロフィー / siRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
反復配列（リピート）の異常伸長を原因とする疾患の一部では、変異アリルから伸長リピート配列を含むRNAが転写される。これらのリピートRNAは「RNA foci」と呼ばれる封入体を主に核内に形成し、RNA結合タンパク質を捕捉する。また、伸長したリピートRNAが細胞質に輸送されると、repeat-associated non-ATG translation (RAN translation)の機構により、リピート由来のポリペプチドを生じる。ペプチドリピートの多くは凝集性を示し、有害であることが示唆されている。このように、「RNA foci」および「RAN translation」はリピート伸長を原因とする各種の神経疾患の発症に深く関わる。そのため、リピートRNAに作用し、RNA fociやRAN translationに影響する因子は、それを操作することで病態を制御できる作用点となる可能性がある。そこで、本課題では、RNAの分解やフォールディングに関わる可能性があるヌクレアーゼおよびヘリカーゼ関連遺伝子に注目し、網羅的なsiRNAスクリーニングによってリピートRNAの動態制御に関わる新規分子経路の同定を試みる。
これまで、ヌクレアーゼ関連遺伝子の中からCUGリピートのRNA fociを減少させる遺伝子を見出した。当該因子の発現抑制はRNA fociを増加させ、逆に過剰発現によりRNA fociが減少した。興味深いことに、この遺伝子はCUGリピートRNA fociの構成タンパク質であるMBNL1のスプライシングにも影響することが示唆された。このスプライシングはMBNL1の核局在性に関わり、RNA fociの形成にも影響し得る。この候補遺伝子は複数の機能ドメインからなるが、現在、どのドメインがRNA fociの形成およびMBNL1のスプライシング制御に関与するかを検討中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
現在注目している因子に関して、予想したよりも複雑な制御機構を持つことが判明し、解析が難航した。そのため、当初予定していた実験まで到達しなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
患者由来細胞における検証実験を行い、論文投稿を目指す。また、新たな候補因子の解析に着手する。
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| Causes of Carryover |
ウイルスベクターおよび患者由来細胞を用いる実験を予定していたが、一部の実験の難航のためにそこまで到達しなかったため、残額が生じた。次年度に当該実験を行う予定である。
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