2022 Fiscal Year Research-status Report
手術検体を用いた脳腫瘍細胞と正常神経細胞間のてんかん原性回路の解明
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22K09273
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| Research Institution | National Center of Neurology and Psychiatry |
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Principal Investigator |
飯島 圭哉 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 病院, 医員 (10751878)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩崎 真樹 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 病院, 部長 (00420018)
川内 大輔 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 神経研究所 病態生化学研究部, 室長 (10400996)
三輪 秀樹 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 精神保健研究所 精神薬理研究部, 室長 (80468488)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | LEAT / epileptogenesis / BRAF / BRAF V600E |
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| Outline of Annual Research Achievements |
低悪性度てんかん原性腫瘍のてんかん発症機序に正常な神経細胞と腫瘍細胞の間に異常なシナプスが双方向性に存在してんかん原性回路となっていることを証明するために本研究を行っている。今年度は本研究のためのヒトサンプルの収集および同意書の取得を行った。まず国立精神・神経医療研究センターにおいて倫理審査を行った後、78症例の低悪性度てんかん原性腫瘍の患者から書面で同意を得た。本研究では、低悪性度てんかん原性腫瘍の内、BRAF V600E変異を有する腫瘍を対象としているため、まず78症例の遺伝子解析を行い、BRAF V600E mutant LEATが45症例で確認された。これらの45症例に関して、術前のMRI所見と術後の病理所見を改めて評価し直し、特徴的な所見を抽出した。また、手術の前後のてんかん発作の消失率に関しても解析を行った。次いで、免疫電顕による腫瘍と神経細胞間のシナプスの存在を証明すべく、まず免疫染色で腫瘍を染色する方法の条件検討を行っている。BRAF V600E muntantの腫瘍はVE1抗体により良好に染色できることがわかった。また、既報告ではnestinを用いて腫瘍を染色しており、今回の腫瘍がnestinで染色可能かどうかの確認作業を行っている。同時に併行してBRAF V600E mutant LEATのモデルマウスの作成を行っており、こちらは継続課題として次年度に結果を報告する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定では初年度に候補となる患者からの同意書の取得と、腫瘍の遺伝子解析によるBRAF V600E muntantの同定を想定しており、概ね初年度の目標を達成できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は免疫染色の条件検討を経て免疫電顕を行い、ヒトの低悪性度てんかん原性腫瘍における正常な神経細胞と腫瘍細胞の間のシナプスの存在を明らかにしていく。また、BRAF V600E muntantのモデルマウスの作成も並行して行っており、モデルマウスを用いたパッチクランプ法により、電気生理学的なてんかん現象の証明も行っていく。
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| Causes of Carryover |
飯島使用予定の端数29271円が次年度繰り越しとなった。また、患者リクルート用で岩崎使用予定の5万円は今年度は飯島の方で購入したコンピュータで行っており、次年度に使用予定として繰り越しとした。
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