2022 Fiscal Year Research-status Report
Elucidate of mechanism of orofacial pain through pain reduction using essential oils in neuropathic pain animal model
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22K10060
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
井上 美穂 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 助教 (20271059)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大島 正充 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 准教授 (00548307)
井上 正久 徳島文理大学, 薬学部, 教授 (20223274)
松香 芳三 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (90243477)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 柑橘系精油 / 痛み / 口腔顔面痛モデル / 三叉神経節 / サイトカイン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
目的：歴史的な背景から，補綴歯科治療において口腔顔面痛の患者を診ることもあり，神経障害性疼痛患者が来院することも多い．薬物療法や外科治療では副作用が強く，新たな治療法が求められている．我々は神経障害性疼痛モデルにおいて三叉神経節のサイトカイン関与を明らかにした．一方，近年ではアロマセラピーで用いられる精油の鎮痛・鎮静作用が注目されており，特に柑橘系のベルガモットは抗炎症・抗酸化作用や炎症促進性サイトカインを抑制するという報告がある．薬物投与となると医療的制限があるが，アロマセラピーは簡便で自己管理できるため，医療補助的ではあるものの費用対効果や有用性が高い．本研究では，口腔顔面痛モデル動物に対する精油成分の痛み抑制の評価を目的とする．
方法：三叉神経の第二枝上顎神経の枝である末梢の眼窩下神経を結紮(IONC: infraorbital nerve constriction injury)，口腔顔面痛モデル動物をSDラットで作製した．精油は痛み軽減効果があるといわれているラベンダー，ベルガモット，レモン，オレンジ，グレープフルーツ，マンダリンを用いた．ゲージに精油を置き，30分吸入させた後，疼痛試験と運動能力の確認を行った．また，痛みモデルラットに精油を吸入させた後，三叉神経節を取り出し，サイトカイン遊離計測と関連するサイトカインの組織学的免疫染色を行った．
結果と考察：痛みモデルラットに対する行動実験では，ベルガモット，レモン，マンダリンの吸入後に痛みの軽減が認められた．運動計測ではラベンダー，ベルガモットでは差が認められず，他の柑橘系精油では吸入後に差が認められた．またサイトカインアレイではCXCL2がすべてにおいて、IL-10, CXCL3がコントロールよりベルガモット、ラベンダーで高い発現が認められた。今後はさらにほかのサイトカインも検討していく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
実験１：口腔顔面痛モデル動物において、精油による痛み行動の変化の計測においては、
三叉神経の枝である眼窩下神経を結紮し(IONC)口腔顔面痛モデル動物を作製した。精油は痛み軽減効果があると言われているベルガモット、マンダリン、レモン、オレンジ、グレープフルーツを用いた。ラットのゲージに精油を置き、30分間吸引させる。その後、機械刺激による痛み閾値を測定することで痛み行動の観察を行った。また、ローターロッドを用いて運動能力の測定を行い、ふらつき等も確認した。精油を吸入後、ベルガモット、ユズでは痛みが軽減されたが、90分後には痛みが戻っていた。
実験２：口腔顔面痛モデル動物三叉神経節からのサイトカイン遊離計測と動態解析
口腔顔面痛モデル動物を作製し、実験1と同様に、各種精油を30分間吸引させたあと、イソフルランを用いて全身麻酔後、断頭し、全脳と三叉神経節を採取、凍結し、組織切片を作製後、免疫染色にて、抗炎症サイトカインIL-10、三叉神経節内での痛み増強に作用する炎症性サイトカインであるCXCL-2,CXCl-3、抗炎症性サイトカインのIL-10を確認した。
３月に学会発表を行い、５月にも行う予定である。今後追加事件を行い、論文作成の準備を進めていく。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、口腔顔面痛モデル動物三叉神経節からのサイトカイン遊離計測と動態解析についてさらに詳しく検討する。
口腔顔面痛モデル動物を作製し、実験1と同様に、各種精油を30分間吸引させたあと、イソフルランを用いて全身麻酔後、断頭し、全脳と三叉神経節を採取、凍結し、組織切片を作製後、免疫染色にて、抗炎症サイトカインIL-10、三叉神経節内での痛み増強に作用するカルシトニン関連ペプチド（CGRP）や炎症性サイトカインであるCXCL2,CXCL3,IL-10が、三叉神経節や視床、視床下部、大脳辺縁系、扁桃体に存在するか確認する。さらに脳の各部組織を回収し定量的リアルタイムPCR、ウエスタンブロット、ERISAを行い、RNA、タンパクの定量を行う。
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| Causes of Carryover |
（理由）本年度の研究に必要な抗体などが、当講座で所有しているものを使用したため、次年度使用額が生じた。
（使用計画）次年度は、さらにさまざまなサイトカインの検討のため、新しく抗体を購入するため、次年度研究費と合わせて使用する計画である。
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Research Products
(1 results)
