Double expressor lymphomaの分子基盤の解析

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K15427
• Research Institution: Saitama Medical University
• Principal Investigator: 高柳 奈津子 (小野澤奈津子) 埼玉医科大学, 医学部, 助教 (30791800)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: DLBCL / Double expressor / MYC / BCL2 / TCF4 / FISH

Outline of Annual Research Achievements

びまん性大細胞型B細胞リンパ腫(DLBCL)は，腫瘍細胞の発生母地(COO)から胚中心B細胞(GCB)型と活性化B細胞(ABC)型に分類されている．一方、MYCとBCL2の蛋白質共発現からdouble expressor lymphoma (DEL) が提唱され，DELの多くがABC型に属し，予後不良群として認識されている．しかしながら，DELの分子病理学的基盤については未だ不明な点が多い．18q21の増幅はABC型DLBCLで最も多いゲノム異常であると報告されているが，その遺伝子座にBCL2がcodeされており，さらにMYCの遺伝子発現を調節しうる分子TCF4も含まれている．18q21の増幅によってBCL2とTCF4の両発現が亢進し，DELの分子基盤になっている可能性がある．本研究では，免疫組織化学やFluorescence in situ hybridization (FISH)を用いて，MYC, BCL2, TCF4の発現の関係を遺伝子増幅の観点から解析することとした．当院のDLBCL症例から作製したTMA約300例に対し，BCL2, TCF4等の免疫組織化学及びFISHを行い検討した．BCL2染色陽性群のうち，GCB typeではBCL2遺伝子再構成を有する群が，non-GCB typeではBCL2遺伝子増幅群が主体をなしており，比較的相互排他的に見られた．TCF4染色では陽性群と陰性群からなる二峰性の染色パターンを示し，二峰性パターンはnon-GCB typeで顕著であった．TCF4免疫染色とTCF4 FISHでの遺伝子増幅に相関を認めた．現在，TCF4, BCL2の発現や遺伝子の増幅とDELとの関連性について検討を行っている．

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

現在まで免疫組織化学および FISH の多くが終了している．

Strategy for Future Research Activity

研究計画は順調に進捗しており，免疫組織化学の結果および FISH の結果を統合し，18q21 の領域の増幅が DEL の分子基盤となりうるかを検討していく．

Causes of Carryover

FISHで使用したプローブが BAC cloneから自研究室で作成可能であったため，次年度への繰り越し金額が多くなった．
次年度では繰り越し金を利用して18q21 領域以外のDLBCLに特徴的な遺伝子変異 profiling と TCF4, BCL2 の蛋白発現との関連性も調べる。具体的には DLBCL DNA 変異パネルを作製し、NGS を用いた遺伝子変異解析を加える予定である。