2023 Fiscal Year Research-status Report
Challenges in developing a method to control salivary secretion using optogenetics to improve oral microflora
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22K19617
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
安部 力 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 准教授 (10585235)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森山 雅文 九州大学, 大学病院, 教授 (20452774)
竹下 徹 九州大学, 歯学研究院, 教授 (50546471)
任 書晃 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 教授 (80644905)
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| Project Period (FY) |
2022-06-30 – 2025-03-31
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| Keywords | 交感神経 / 副交感神経 / 顎下腺 / 耳下腺 / 口腔保健 / 唾液 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
神経を特異的に刺激するオプトジェネティクス（光遺伝学）技術は，ターゲット神経細胞にウイルスベクターや遺伝子改変動物の交配によって光受容体タンパクを発現させ，光を照射することで神経細胞を特異的に操作することができる。今年度の研究では，この技術を耳下腺の副交感神経に適用し，副交感神経光刺激を用いた唾液分泌促進手法を確立した。
具体的には，ChAT-cre（副交感神経）マウスとChR2-floxマウスをかけ合わせて，耳下腺を支配する副交感神経を操作できるマウスを作製した。約4週間のリカバリーの後，青色光照射を用いた唾液分泌能を電気抵抗測定器を用いて定量的に評価した。耳下腺内に電気抵抗測定器のプローブを挿入し，青色光照射にて副交感神経を活性化すると，耳下腺内電気抵抗値は低下した。このことから，副交感神経活性化にて唾液分泌が促されていることが示唆された。
さらに，光ファイバーを埋入・装着することなく耳下腺副交感神経刺激ができる，近赤外光と希土類のランタノイドを用いた手法にて実験を行った。耳下腺上にランタノイドシートを埋入し，体外から近赤外光を照射すると，耳下腺内電気抵抗値は低下した。このことから，体外からの近赤外光照射を用いることで，低侵襲的に唾液分泌を促すことができる可能性が示唆された。これにより，自由行動下のマウスの耳下腺を長期間刺激することで，口腔内微生物叢の構成変化を捉えることができる可能性が考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
論文投稿もできていることから，おおむね順調に進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
近赤外光を用いた耳下腺および顎下腺副交感神経操作による口腔内微生物叢構成への影響を明らかにするために、以下の手法で研究を進めていく。
1) 近赤外光で唾液腺操作ができるマウスおよびそのコントロールマウスを作製する。
2) これらのマウスを断続的に近赤外光照射できるケージ内で照射しながら2～4週間飼育する。
3) 飼育終了時にマウスの口腔内微生物を採取し、網羅的16S rRNA遺伝子解析により各マウスの口腔内微生物叢構成を明らかにする。
4) さらに口腔乾燥症患者の唾液腺組織切片の免疫染色を行い，ヒトへの応用可能性を検討する。
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| Causes of Carryover |
組織切片作製装置の故障により，試薬購入が延期になった。次年度に，試薬等購入費に充てる予定である。
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