2011 Fiscal Year Research-status Report
単層培養からの自然発生スフェロイドの特性解明と阻害剤の探索研究
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23501310
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| Research Institution | Iwate Medical University |
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Principal Investigator |
上原 至雅 岩手医科大学, 薬学部, 教授 (50160213)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| Keywords | がん / 幹細胞 / 細胞接着 / 造腫瘍性 / 薬学 / 阻害剤 / 抗がん剤 |
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| Research Abstract |
乳がん細胞株を高密度培養することにより生じた自然発生浮遊細胞塊を回収し、がん幹細胞マーカーの発現、各種抗がん剤に対する感受性や軟寒天培地中でのコロニー形成能及びヌードマウス皮下への造腫瘍性等を解析した。CD133、CD44、CD24、Oct4、Nanogなどの幹細胞マーカーの発現をウェスタンブロット法により解析したところ、スフェロイドではCD133の発現が優位に上昇することが分かったが、継代によって発現が低下する傾向が見られた。そこで、マーカー発現細胞のポピュレーションの変動や細胞内局在等に特徴的な変化があるかないかを今後明らかにする。次に、がん幹細胞様スフェロイド集団を用いて抗がん剤に対する感受性を比較したところ、ドキソルビシン、エトポシド、マイトマイシンCに対する感受性の低下が観察された。一方、造腫瘍性と最も相関性が高い事が知られている軟寒天培地中でのコロニー形成能を調べたところ、コロニー形成率はむしろ低下した。また、ヌードマウス皮下への造腫瘍性についても検討を加えたが、がん幹細胞様集団は親株細胞に比較して造腫瘍性が低いことが明らかとなった。低い造腫瘍性は、がん幹細胞のDormancyを反映する結果と解釈することもできるため、今後の検討課題とする。今後、がん幹細胞様集団の遺伝子発現プロファイリングを行い、その性質の分子基盤に関する情報を得る。また、がん幹細胞に特異的に増殖阻害活性を示す化合物の探索を進める。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
３年計画の１年目の研究としてはおおむね順調に進展していると考えられる。幹細胞マーカーの発現の不安定性や造腫瘍性の指標の低下など、想定外の結果が得られたが、これらはむしろがん幹細胞のDormancyを反映する結果と解釈することもできる。今後、一層の検討が必要である。
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| Strategy for Future Research Activity |
がん幹細胞様集団の遺伝子発現プロファイリングを行い、その性質の分子基盤に関する情報を得る。また、がん幹細胞に特異的に増殖阻害活性を示す化合物の探索を進める。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
遺伝子発現プロファイリングの解析薬剤感受性試験とスクリーニング免疫不全マウスを用いた造腫瘍能の解析
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