2012 Fiscal Year Research-status Report
糖転移酵素を用いた糖鎖の構造特異的分解反応の検討と応用
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23550099
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| Research Institution | Saga University |
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Principal Investigator |
鄭 文玉(池田義孝) 佐賀大学, 医学部, 教授 (60252657)
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| Keywords | 糖鎖 / フコース転移酵素 / 糖転移酵素 / 糖ヌクレオチド / 逆反応 |
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| Research Abstract |
糖鎖は糖転移酵素群の高い基質特異性によって生合成される。本研究は、糖転移酵素による糖転移反応の逆反応に基づいた構造特異的分解を検討すること、またこのような逆反応を糖鎖構造の決定に利用することが目的である。すなわち、試験管内で糖鎖生合成を逆行させるという逐次分解法を検討し、新たな構造解析のベースとなりうるような糖鎖の高特異性逐次分解反応を確立する。平成２４年度は前年度から引き続きGDP-フコースの分解系の至適条件の検討を行うとともに、逆反応の化学量論を再検討すること、本来の基質であるN型糖鎖以外のオリゴ糖を基質にしたフコシル化糖鎖の作製とそれを用いたより扱いやすい逆反応系の検討も併せて行っているところである。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
昨年度までの結果をさらに進展させるために、組換え酵素が大量に調整しさらに検討を進めている。今のところ、満足出来るレベルで十分に糖の除去反応を進行させることが出来ていない。そのため、他の基質を用いた反応系も視野にいれ、とくに我々がこれまでに明らかにしてきたキトオリゴ糖を基質として用いた反応系についても同様の検討を始めている。こちらの系を用いることにより、糖転移酵素逆反応を用いたいわゆる糖の除去を定量的に進行させる条件の設定を検討しやすくなる可能性がある。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き、糖ヌクレオチドの分解系の活性に至適な条件を検討するとともに、上記のような他のオリゴ糖を用いた反応系についても検討を行い、どのような要因（オリゴ糖基質の性質、ヌクレオチド、糖ヌクレオチド、pH、基質濃度、酵素濃度等）が大きく影響するのかを系統的に検討し、条件を至適化していく。また、同時に他の糖転移酵素あるいはオリゴ糖に適用し、その汎用性についても明らかにしていきたい。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
平成２４年度は、結果的に学会発表が近場であったため旅費がほとんど必要なかったこと、研究自体が多少膠着した時期があったため研究費を次年度に持ち越すことになった。この研究費分については、使用時期が多少ずれてしまったが、最終年度である平成２５年度の研究の進展のために充てることになる。使用目的としては、当初の計画どおり主として消耗品に使用するが、いくつか予定している論文発表（校正、出版）の費用にも適切な額を充てる。
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