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2012 Fiscal Year Annual Research Report

アクアフォトミクスを用いた生体内水分子構造の解析による細胞の生存能力診断

Research Project

Project/Area Number 23658211
Research InstitutionKobe University

Principal Investigator

ルミアナ ツエンコヴア  神戸大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (30294200)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 近江戸 伸子  神戸大学, 人間発達環境学研究科, 教授 (30343263)
Keywords近赤外分光法
Research Abstract

本研究の目的は、近赤外分光法及びアクアフォトミクスによりDNAやタンパク質などの生体システムにおける働きを、生体分子と水分子との相互作用により明らかにすることである。4種類の異なるDNA(直鎖λDNA、および直鎖が含まれる3つの環状複合鎖)を濃度が5 ng/μLとなるよう超純水に加えた。また、λDNAを制限酵素Hind IIIまたはXba Iで切断したサンプル、および環状複合鎖をBamH Iで切断したサンプルを、それぞれ濃度5 ng/μLで準備した。それぞれのDNAサンプルの塩基対数の違いは、アガロースゲル電気泳動の結果から確認された。各サンプルは、直接希釈により5‐0.625 ng/μLの4段階に調整、8種類のDNAの総計32サンプルから近赤外スペクトルを室温で各サンプルに対して3回連続で測定し、水分子振動に関係するOH第1倍音領域を解析に用いた。まず、DNAの測定毎に測定した超純水スペクトルによる差スペクトルの算出により、DNAのスペクトル情報を強調させた。そして、主成分分析を用いたSIMCA法により、λDNAおよび制限酵素により切断されたものを直鎖DNAとし、切断しない環状DNAとの識別を行った。各サンプルを連続で測定したスペクトルから、1・3回目に測定したものをモデル構築セットとし、2回目に測定したものを予測セットとした。直鎖および環状DNAに対して、75%および79%の識別モデルが構築され、75%および75%の識別予測結果がそれぞれ得られた。また、各DNAを独立させた全4段階の濃度に対してPLS回帰モデルを構築すると、全8種類のDNAから相関係数Rが0.911<R<0.999の高精度の定量モデルが得られた。これらのモデルは、他のDNAデータに対して-0.834<R<0.882の定量予測結果を示し、それぞれの回帰ベクトルが各DNAに固有であることが確認された。

  • Research Products

    (3 results)

All 2013 2012

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Characterisation of hydrogen bond perturbations in aqueous systems using aquaphotomics and multivariate curve resolution-alternating least squares2013

    • Author(s)
      Gowen, A.A.
    • Journal Title

      Analytica Chimica Acta

      Volume: 759 Pages: 8-20

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Spectral pattern of urinary water as a biomarker of estrus in the giant panda2012

    • Author(s)
      Kinoshita, K., Miyazaki, M., Morita, H., Vassileva, M., Tang, C., Li, D., Ishikawa, O., Kusunoki, H., Tsenkova, R.
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: Vol.2、No.856 Pages: 1-9

    • DOI

      DOI:10.1038/step00856

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 近赤外分光法を用いたインスリンアミロイド形成過程の非破壊モニタリング2013

    • Author(s)
      &#61548; 土坂祐太郎
    • Organizer
      第28回近赤外フォーラム
    • Place of Presentation
      沖縄
    • Year and Date
      20130306-20130309

URL: 

Published: 2014-07-24  

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