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2014 Fiscal Year Annual Research Report

放射光真空紫外円二色性による蛋白質精密構造解析の新展開

Research Project

Project/Area Number 23687020
Research InstitutionHiroshima University

Principal Investigator

松尾 光一  広島大学, 放射光科学研究センター, 助教 (40403620)

Project Period (FY) 2011-04-01 – 2015-03-31
Keywords放射光 / 真空紫外 / 円二色性 / 蛋白質 / 時間分解 / 生体膜 / マイクロ流路 / 二次構造
Outline of Annual Research Achievements

放射光真空紫外円二色性(VUVCD)を用いた蛋白質構造解析法の開発を進めた。以下に研究内容の概略を記す。
1.時間分解VUVCD測定システムの構築:放射光を利用したVUVCD装置は,市販のCD装置よりも良好なS/Nでスペクトル測定ができるため,蛋白質の時間に依存した構造変化の追跡に有効である。そこで本年度は,マイクロ流路型の時間分解セルの開発を行った。2種類の溶液が測定ポイントで均一にMixingされていることを確認した後,VUVCD装置用のセルホルダーを作成し,放射光を用いた動作確認を行った。今後,このシステムを用いて,生体膜相互作用における蛋白質構造の時間変化について調査する予定である。
2.VUVCDによる種々の生体膜と相互作用したα1-酸性糖タンパク質(AGP)の構造解析:VUVCD分光法により,水溶液中における蛋白質の二次構造の含量・本数・配列・配向解析が可能となっている。そこで本年度は,この手法を様々な生体膜[Dimyristoylphosphatidylcholine (DMPC), dimyristoylphosphatidyl ethanolamine (DMPE), dimyristoylphosphatidic acid (DMPA), dimyristoyl phosphatidyl glycerol (DMPG)]と相互作用したAGPの構造解析に応用した。その結果,リン脂質頭部のマイナス電荷(リン酸基由来)が,AGPと生体膜の相互作用にとって重要な因子であることを示唆され,DMPCやDMPEのリン脂質頭部のethanolamineやcholineのプラス電荷は,相互作用を阻害することが分かった。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (12 results)

All 2015 2014 Other

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (7 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Characterization of intermolecular structure of β2-microglobulin core fragments in amyloid fibrils by vacuum-ultraviolet circular dichroism spectroscopy and circular dichroism theory2014

    • Author(s)
      K. Matsuo, H. Hiramatsu, K. Gekko, H. Namatame, M. Taniguchi, R. W. Woody
    • Journal Title

      J. Phys. Chem. B

      Volume: 118 Pages: 2785-2795

    • DOI

      10.1021/jp409630u

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Role of cysteine residues in the V (V)-reductase activity of Vanabin22014

    • Author(s)
      S Yamamoto, K Matsuo, H Michibata, T Ueki
    • Journal Title

      Inorg. Chim. Acta

      Volume: 420 Pages: 57-52

    • DOI

      10.1016/j.ica.2013.11.023

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Overexpression, purification, and characterization of Paenibacillus cell surface-expressed chitinase ChiW with two catalytic domains2014

    • Author(s)
      T. Itoh, I. Sugimoto, T. Hibi, F. Suzuki, K. Matsuo, Y. Fujii, A. Taketo, H. Kimoto
    • Journal Title

      Biosci. Biotech. Biochem.

      Volume: 78 Pages: 624-634

    • DOI

      10.1080/09168451.2014.891935

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] An alternative allosteric regulation mechanism of an acidophilic L-lactate dehydrogenase from Enterococcus mundtii 15-1A2014

    • Author(s)
      Y. Matoba, M. Miyasako, K. Matsuo, Kosuke Oda, M. Noda, F. Higashikawa, T. Kumagai, M. Sugiyama
    • Journal Title

      FEBS Open Bio.

      Volume: 4 Pages: 834-847

    • DOI

      10.1016/j.fob.2014.08.006

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 真空紫外円二色性・線二色性分光法による生体膜結合蛋白質の構造解析2015

    • Author(s)
      松尾光一,生天目博文,谷口雅樹,月向邦彦
    • Organizer
      日本化学会 第95春季年会
    • Place of Presentation
      船橋
    • Year and Date
      2015-03-26 – 2015-03-29
  • [Presentation] Conformation Analysis of Membrane-Bound Proteins by Vacuum-Ultraviolet Circular-Dichroism and Linear-Dichroism Spectroscopy2015

    • Author(s)
      Koichi Matsuo, Hirofumi Namatame, Masaki Taniguchi, Kunihiko Gekko
    • Organizer
      The 19th Hiroshima International Symposium on Synchrotron Radiation
    • Place of Presentation
      Hiroshima
    • Year and Date
      2015-03-05 – 2015-03-06
  • [Presentation] 真空紫外円二色性による種々の生体膜と相互作用したα1-酸性糖タンパク質の構造解析2015

    • Author(s)
      松尾光一,生天目博文,谷口雅樹,月向邦彦
    • Organizer
      第28回放射光学会年会
    • Place of Presentation
      滋賀
    • Year and Date
      2015-01-10 – 2015-01-12
  • [Presentation] Interaction Mechanism of α1-Acid Glycoprotein with Biomembrane Characterized by Vacuum-Ultraviolet Circular Dichroism Spectroscopy2014

    • Author(s)
      Koichi Matsuo, Hirofumi Namatame, Masaki Taniguchi, Kunihiko Gekko
    • Organizer
      The 52nd Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
    • Place of Presentation
      Sapporo
    • Year and Date
      2014-09-25 – 2014-09-27
  • [Presentation] 放射光真空紫外円二色性を用いたタンパク質の構造解析2014

    • Author(s)
      松尾 光一
    • Organizer
      日本分析化学会・第63年会
    • Place of Presentation
      広島
    • Year and Date
      2014-09-17 – 2014-09-19
  • [Presentation] Experimental and Theoretical Studies of Vacuum-Ultraviolet Circular Dichroism of Sugars in Aqueous Solution2014

    • Author(s)
      Koichi Matsuo
    • Organizer
      Origins 2014 International Conference
    • Place of Presentation
      奈良
    • Year and Date
      2014-07-06 – 2014-07-11
  • [Presentation] Characterization of Intermolecular Structure of β2-Microglobulin Core Fragments in Amyloid Fibrils by Vacuum-Ultraviolet Circular Dichroism Spectroscopy and Circular Dichroism Theory2014

    • Author(s)
      Koichi Matsuo, Hirotsugu Hiramatsu, Kunihiko Gekko, Hirofumi Namatame, Masaki Taniguchi, Robert W. Woody
    • Organizer
      Symposium on Molecular Chirality 2014
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      2014-06-06 – 2014-06-07
  • [Remarks] 放射光真空紫外円二色性分光法

    • URL

      http://home.hiroshima-u.ac.jp/koichi/

URL: 

Published: 2016-06-01  

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