2023 Fiscal Year Research-status Report
Interactomics of Runx family proteins
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23K07823
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| Research Institution | Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
奥山 一生 国立研究開発法人理化学研究所, 生命医科学研究センター, 研究員 (60712750)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Keywords | Runx転写因子 / 分子間相互作用解析 / BioID法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Runx転写因子はαサブユニットとCbfbで構成されるヘテロ二量体である。哺乳類ではRunx1、2、3のαサブユニットが存在するが、その機能的差異は不明である。血液細胞分化に重要なRunx1およびRunx3の機能解析を行うために、BioID法を用いた分子間相互作用解析を行うことを計画した。そのために当初Runx3-AirIDノックインマウスを作製する予定であったが、所属研究室においてRosa26領域よりscFv-AirIDを発現するマウス系統を樹立し、その有効性が確認できたことから、GCN4付加Runx1、Runx3を発現するマウスを作製することを計画した。GCN4はscFvの特異的な抗原であり、GCN4を標的タンパク質に付加することで、GCN4/scFv反応を介してAirIDを標的タンパク質に動員することができる。当該年度では、Runx1-GCN4マウス系統を樹立し、すでに樹立していたRunx1-AirIDマウスと共に表現型解析を行った。その結果いずれのマウスも生存・生殖が可能であり、ヘテロ個体では胸腺内T細胞分化についても概ね正常であることが分かった。Runx3-GCN4マウスを作製するために、ガイドRNA、ドナーDNAの設計を行い、受精卵でのゲノム編集を実施したが、ノックイン個体が得られなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Runx3-GCN4マウスの作製において、ゲノム編集によるノックイン個体が得られなかったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
Runx3-GCN4マウス系統を樹立するために、再度受精卵を用いてのゲノム編集を行う。
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