2023 Fiscal Year Research-status Report
| Project/Area Number |
23K15451
|
|---|
| Research Institution | The University of Tokushima |
|---|
Principal Investigator |
和田 佑馬 徳島大学, 病院, 特任助教 (80773944)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2025-03-31
|
| Keywords | エクソソーム / microRNA / 耐性株 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
【背景】切除不能肝細胞癌においてlenvatinibが広く使用されるようになってきたが、薬剤耐性の獲得が問題である。その一つに、Nrf2シグナルが知られているが、その詳細な機序は不明である。今回Nrf2を基軸とし、エクソソームを介した腫瘍間interactionによるLenvatinib耐性機序を検討した。
【結果】肝細胞癌細胞株Huh7を用い、1週毎に培養液中のLenvatinib濃度を増加させ20μMで耐性株（4倍耐性）を樹立し、親株と耐性株で比較検討を行った。耐性株では親株に比し、悪性度の上昇を認めた。また、Nrf2 mRNAの発現は増強し、WBでは核内のNrf2の発現が増強し、蛍光免疫染色で有意な核内移行を認めた。遺伝子発現では、stemness markerの上昇を認め、Nrf2の発現は耐性株で有意に高発現であった。コロニーフォーミングアッセイでは、Nrf2阻害によりレンバチニブの耐性が解除されており、遺伝子発現でも耐性株で発現増強していたNrf2やCD44はNrf2阻害により低下していた。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
肝細胞癌細胞株に化学療法(Lenvatinib/Sorafenib)を投与し、化学療法耐性肝細胞株を樹立することに成功した。さらに、親株と耐性株で比較検討を行い、耐性株で腫瘍悪性度が上昇することを確認した。つまり、耐性株では通常の癌細胞株に比べて、増殖能が高く、浸潤能も化学療法存在下でも阻害されないという結果であった。そして、遺伝子発現では、NanogやCD44といったstemness markerや、Nrf2の発現は耐性株で有意に高発現であった。コロニーフォーミングアッセイでは、Nrf2阻害によりレンバチニブの耐性が解除されており、遺伝子発現でも耐性株で発現増強していたNrf2やCD44はNrf2阻害により低下していた。また、耐性株でPINK1は高発現していたが、Nrf2を阻害することで発現は減弱し、オートファジーマーカーのLC3はミトコンドリア内に発現しており、PINK1によるマイトファジーの増強が示され、Nrf2の阻害によりその発現も減弱していた。以上より、概ね順調に進展していると評価した。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は、化学療法耐性細胞株から分泌されるエクソソームの特徴として、分泌されるエクソソームの特徴に関する検討を行う予定である。耐性株から分泌されるエクソソーム特性において、化学療法耐性株から放出される特異的なエクソソームmiRNAを同定する。その同定されたエクソソームmiRNAを阻害し、腫瘍悪性度や治療抵抗性を比較検討する。
|
-
[Journal Article] Curcumin-Mediated Resistance to Lenvatinib via EGFR Signaling Pathway in Hepatocellular Carcinoma.2023
Author(s)
Miyazaki K, Morine Y, Xu C, Nakasu C, Wada Y, Teraoku H, Yamada S, Saito Y, Ikemoto T, Shimada M, Goel A.
-
Journal Title
Cells.
Volume: 14
Pages: 612-612
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] An exosome-based liquid biopsy signature for pre-operative identification of lymph node metastasis in patients with pathological high-risk T1 colorectal cancer.2023
Author(s)
Miyazaki K, Wada Y, Okuno K, Murano T, Morine Y, Ikemoto T, Saito Y, Ikematsu H, Kinugasa Y, Shimada M, Goel A.
-
Journal Title
Mol Cancer.
Volume: 6
Pages: 22-22
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Transanal lateral lymph node dissection with intraoperative hologram support in low rectal cancer.2023
Author(s)
Tokunaga T, Sugimoto M, Saito Y, Kashihara H, Yoshikawa K, Nakao T, Nishi M, Takasu C, Wada Y, Waki Y, Yoshimoto T, Noma T, Shimada M.
-
Journal Title
Surg Endosc.
Volume: 37
Pages: 5414-5420
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
-
