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2014 Fiscal Year Annual Research Report

ショウジョウバエ生殖細胞系列の性決定機構の解明

Research Project

Project/Area Number 24247011
Research InstitutionOkazaki Research Facilities, National Institutes of Natural Sciences

Principal Investigator

小林 悟  大学共同利用機関法人自然科学研究機構(岡崎共通研究施設), 岡崎統合バイオサイエンスセンター, 教授 (90225508)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2016-03-31
Keywords生殖細胞 / 性決定 / ショウジョウバエ / ヒドラ
Outline of Annual Research Achievements

生殖系列の性決定機構はいまだ解明されていない。私たちは、ショウジョウバエの生殖系列において、Sxlと呼ばれるRNA結合タンパク質が、細胞自律的に働きメス化を誘導することを明らかにした。前年度までに、GFPを融合したSxlを生殖系列で発現させ、RIP解析により、その融合タンパク質と結合するRNAを同定した。さらに、そこから、生殖系列の時系列トランスクリプトームデータをもとに生殖系列で発現するRNAを119種類同定した。本年度はこれら遺伝子(RNA) の機能阻害実験を行い、Sxl下流候補遺伝子(RNA)を絞り込むことを試みた。これらRNAに対するdsRNAを生殖系列で発現させそれぞれの機能阻害を行った。まず、Sxlの機能を初期PGCにおいて阻害すると、メス化が不完全となり卵巣中で腫瘍化することが知られている。同様に、上記のように同定した119種類の遺伝子のうち遺伝子A(仮称)の機能阻害を行うとSxlの機能阻害と同様の表現型を生じた。このことは、この遺伝子がSxlの下流で働くことを強く示唆する。そのほか、Sxlの下流で働く候補遺伝子としてNHP2も同定した。
ヒドラを用いた研究に関しては、ヒドラから多能性幹細胞、雄性生殖幹細胞、雌性生殖幹細胞をセルソーターを用いて単離することに成功しており、現在RNAseqを行っている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本年度は、Sxl下流候補遺伝子を同定することに成功した。今後これらの詳細な機能解析や発現解析などにより、Sxlの関わる遺伝子経路を明らかにすることができる。さらに、ヒドラにおいて、多能性幹細胞と生殖幹細胞の相違や雌雄差を生み出す遺伝子を同定し、ショウジョウバエと比較することにより、雌雄差を生み出す普遍的なメカニズムを明らかにすることができると予想される。

Strategy for Future Research Activity

今後は、Sxl下流候補遺伝子の機能解析や発現解析を進め、Sxlの関わる遺伝子経路を特定する。また、ヒドラにおいて多能性幹細胞や雌性/雄性生殖幹細胞を特徴付ける遺伝子発現を明らかにするとともに、ショウジョウバエとの共通性を明らかにする。

  • Research Products

    (8 results)

All 2015 2014

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results,  Open Access: 3 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (2 results) (of which Invited: 2 results)

  • [Journal Article] Autocrine regulation of ecdysone synthesis by β3-octopamine receptor in the prothoracic gland is essential for Drosophila metamorphosis2015

    • Author(s)
      Y. Ohhara, Y. Shimada-Niwa, R. Niwa, Y. Kayashima, Y. Hayashi, K. Akagi, H. Ueda, K. Yamakawa-Kobayashi and S. Kobayashi
    • Journal Title

      Proc. Natl. Acad. Sci., USA.

      Volume: 112 Pages: 1452-1457

    • DOI

      10.1073/pnas.1414966112

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Analysis of Hydra PIWI proteins and piRNAs uncover early evolutionary origins of the piRNA pathway2014

    • Author(s)
      R. S M Lim, A. Anand, C. Nishimiya-Fujisawa, S. Kobayashi and T. Kai
    • Journal Title

      Dev. Biol.

      Volume: 386 Pages: 237-251

    • DOI

      10.1016/j.ydbio.2013.12.007.

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Enrichment of spermatogonial stem cells using side population in teleost2014

    • Author(s)
      M. Hayashi, M. Sato, Y. Iwasaki, T. Onozawa, N. Katayama, Y. Nagasaka, S. Sadaie, S. Kobayashi and G. Yoshizaki
    • Journal Title

      Biology of Reproduction

      Volume: 91 Pages: 1-8

    • DOI

      10.1095/biolreprod.113.114140.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Analysis of a novel gene, Sdgc, reveals sex chromosome dependent differences of medaka germ cells prior to gonad formation2014

    • Author(s)
      T. Nishimura, A. Herpin, T. Kimura, I. Hara, T. Kawasaki, S. Nakamura, Y. Yamamoto, T. Saito, J. Yoshimura, S. Morishita, T. Tsukahara, S. Kobayashi, K. Naruse, S. Shigenobu, N. Sakai, M. Schartl, and M. Tanaka
    • Journal Title

      Development

      Volume: 141 Pages: 3363-3369

    • DOI

      10.1242/dev.106864.

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Pri peptides are mediators of ecdysone for the temporal control of development2014

    • Author(s)
      H. Chanut-Delalande, Y. Hashimoto, A. Pelissier-Monier, R. Spokony, A. Dib, T. Kondo, J. Bohere, K. Niimi, Y. Latapie, S. Inagaki, L. Dubois, P. Valenti, C. Polesello, S. Kobayashi, B. Moussian, K. White, S. Plaza, Y. Kageyama, and F. Payre
    • Journal Title

      Nature Cell Biol.

      Volume: 16 Pages: 1035-1044

    • DOI

      10.1038/ncb3052

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] H3K36 trimethylation-mediated epigenetic regulation is activated by Bam and promotes germ cell differentiation during early oogenesis in Drosophila2014

    • Author(s)
      M. Mukai, S. Hira, K. Nakamura, S. Nakamura, H. Kimura, M. Sato, and S. Kobayashi
    • Journal Title

      Biology Open

      Volume: 4 Pages: 119-124

    • DOI

      10.1242/bio.201410850

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Germline formation by maternal factors in Drosophila embryos2014

    • Author(s)
      S. Kobayashi
    • Organizer
      47th Annual Meeting for the Japanese Society of Developmental Biologists
    • Place of Presentation
      WINC Aichi, Nagoya, Aichi
    • Year and Date
      2014-05-27 – 2014-05-30
    • Invited
  • [Presentation] Germline formation from multipotent stem cells in Hydra2014

    • Author(s)
      C. Fujisawa, S. Kobayashi
    • Organizer
      47th Annual Meeting for the Japanese Society of Developmental Biologists
    • Place of Presentation
      WINC Aichi, Nagoya, Aichi
    • Year and Date
      2014-05-27 – 2014-05-30
    • Invited

URL: 

Published: 2016-06-03  

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