2014 Fiscal Year Annual Research Report
船底防汚塗料候補物質含ハロゲン化合物の酵素反応による合成
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24380112
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
沖野 龍文 北海道大学, 地球環境科学研究科(研究院), 准教授 (30280910)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松田 冬彦 北海道大学, 地球環境科学研究科(研究院), 教授 (10219446)
梅澤 大樹 北海道大学, 地球環境科学研究科(研究院), 准教授 (20503618)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 付着阻害 / タテジマフジツボ / 紅藻 / ブロモペルオキシダーゼ / ブロモアレン / ハチジョウジマレン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
トリテルペノイドであるチルシフェロールを生産するマギレソゾからゲノムDNAを抽出し、インバースPCRによりマギレソゾのバナジウム依存型ブロモペルオキシダーゼ(LsVBPO)を取得した。C15化合物を生産するウラソゾやミツデソゾ由来のVBPOとの同一性は６５％であり、バナジウム活性中心を校正するアミノ酸残基は良好に保存されていたものの、配列の差異が大きいことがわかった。ゲノムDNAからクローニングされたLsVBPOは、藻体で発現していることが確認された。そのPCR産物はゲノムDNA由来のLsVBPO全長配列に対して97%の同一性を示し、イントロンを含まないことが示された。大腸菌発現系でLsVBPO組み換えタンパク質を調製し、酵素の性状を調べた。臭素付加活性はウラソゾに比べて低く、至適pHや温度体制にも若干の差がみられた。また、透析・濃縮により失活するなど、ウラソゾのVBPOに比べて不安定であった。
ハチジョウジマレンは、八丈島産未同定ソゾから単離されたブロモアレンを有する化合物である。タテジマフジツボに対する付着阻害活性はEC50が150 ng/mLと非常に強い。ハチジョウジマレンの構造についてデータを精査した上で、学会発表を行った。
さらに、ハチジョウジマレンの全合成を目指してD－グルコースを出発物質としてヘミアセタールを合成し、１，３－ジケトンとのカップリング反応を鍵反応とする合成計画をたて、カップリング反応の反応物の調製、モデル化合物による鍵反応の条件検討などを行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初予定通りトリテルペノイドを生産するマギレソゾのブロモペルオキシダーゼについて解析を進めることができた。また、ハチジョウジマレンの全合成研究も順調である。
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| Strategy for Future Research Activity |
次世代シークエンサーのデータも活用して生合成酵素研究をさらに加速させる。
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| Causes of Carryover |
平成２５年度使用額の支払日が２６年４月以降となったため、帳簿上生じたもの
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
実際には平成２５年度に全額使用済み
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Research Products
(5 results)
