2014 Fiscal Year Annual Research Report
ヒト化マウス解析法によるヒト血液病原性ウイルスの増殖と宿主応答メカニズムの解明
| Project/Area Number |
24390112
|
|---|
| Research Institution | Kyoto University |
|---|
Principal Investigator |
小柳 義夫 京都大学, ウイルス研究所, 教授 (80215417)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
|
| Keywords | ヒト化マウス / HIV / APOBEC3 / アクセサリ蛋白質 / Vif / シチジン脱アミノ酵素 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト化マウスを用いたHIV-1アクセサリ蛋白質の解析
培養細胞研究からシチジン脱アミノ酵素であるAPOBEC3（A3）、特にA3FとA3Gは、HIV粒子に取り込まれ、その遺伝子へのG→A変異誘導により感染を阻害する蛋白質であると認知される。一方、HIVアクセサリ蛋白質のひとつであるVifは、プロテアソーム経路依存的にA3を分解し、そのウイルス粒子への取込みを阻害する。A3は強力な抗HIV分子であるが、それによるG→A変異がウイルスの多様化を促進するとの報告もある。しかしながら、感染個体内において、どのA3が抗HIV活性を示すのか、A3によるG→A変異はHIVの多様化に影響を与えるのか、不明であった。本研究では、内在性A3のHIV感染への影響を解明するために、自然免疫反応としてA3を発現するヒト化マウスモデルを用いた。
CCR5指向性野生型HIV、A3F非分解変異体VifをコードするHIV(4A)、A3G非分解変異体VifをコードするHIV(5A)をそれぞれヒト化マウスに接種した。血中ウイルスRNA量とCD4+ T細胞数を経時的に測定した。感染後6週齢のマウス脾臓細胞におけるプロウイルスDNA配列と血漿中のウイルスRNA配列をそれぞれ解析した。その結果、4A および5A 感染マウスにおける増殖率は、野生型HIVに比して有意に低く、5A のそれは4A に比して有意に低下していた。proviral DNA配列の解析の結果、4A 感染マウスではGA→AA変異が顕著に観察され、5A 感染マウスではGG→AG変異が有意に観察された。そして血中ウイルスRNA配列は、脾臓のproviral DNAの変異パターンと異なっており、4A の多様性は野生型HIVおよび5A のそれに比べ、有意に高かった。さらにCXCR4を共受容体とするウイルスが4A 感染マウスに出現していた。
|
| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Causes of Carryover |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
Research Products
(10 results)
-
[Journal Article] Quantification of deaminase activity-dependent and -independent restriction of HIV-1 replication mediated by APOBEC3F and APOBEC3G through experimental-mathematical investigation2014
Author(s)
Kobayashi, T., Koizumi, Y.‡, Takeuchi, JS., Misawa, N., Kimura, Y., Morita, S., Aihara, K., Koyanagi, Y., Iwami, S., Sato, K.
-
Journal Title
Journal of Virology
Volume: 88
Pages: 5881-5887
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
-
[Journal Article] APOBEC3D and APOBEC3F potently promote HIV-1 diversification and evolution in humanized mouse model2014
Author(s)
Sato, K., Takeuchi, JS., Naoko Misawa, Izumi, T., Kobayashi, T., Kimura, Y., Iwami, S., Takaori-Kondo, A., Hu, W-S., Aihara, K., Ito, M., An, DS., Pathak, VK. Koyanagi, Y.
-
Journal Title
PLOS Pathogens
Volume: 10
Pages: e1004453
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
-
-
-
[Presentation] APOBEC3F potently promotes HIV-1 diversification and evolution in humanized mouse model2014
Author(s)
Sato, K., Shibata, J., Izumi, T., Misawa, N., Kobayashi, T., Kimura, Y., Ito, M., Pathak, V. K., Koyanagi, Y.
Organizer
Cold Spring Harbor Laboratory Meeting on Retroviruses
Place of Presentation
New York
Year and Date
2014-05-19 – 2014-05-24
-
-
-
