2014 Fiscal Year Annual Research Report
白血病性幹細胞に対するキメラ抗原受容体を用いた遺伝子改変Ｔ細胞療法の開発
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24390260
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
小池 健一 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (40143979)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂下 一夫 信州大学, 医学部附属病院, 特任研究員 (10345746)
中沢 洋三 信州大学, 学術研究院(医学部附属病院), 講師 (60397312)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 白血病性幹細胞 / 免疫療法 / 小児白血病 / 骨髄異形成症候群 / CAR T細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
若年性骨髄単球性白血病（JMML）の白血病性幹細胞に発現しているサイトカイン受容体（GM-CSF receptor, GMR）に結合して特異的な殺傷効果を示すキメラ抗原受容体（CAR）T細胞療法の開発を行った。
CD3/CD28刺激とIL-15により体外増幅された健常人由来のGMR.CAR-T細胞とPTPN11変異やNRAS変異を有する5名のJMML患者のCD34陽性細胞を1:1、1:4で混和し、SCF、TP0、IL-3存在下で、2日間培養し、コロニー数を算定した。GMR.CAR-T細胞はE/T比＝1:1でJMML患者CD34陽性細胞から形成されるコロニー数を約10%に減少させたのに対して、mock-T細胞では明らかなコロニー数の減少は認められなかった。6MP治療を受けていたJMML患者の末梢血から作製したGMR.CAR-T細胞は、自身の診断時のCD34陽性細胞に対して明らかな殺傷効果を示し、その効果は健常人のGMR.CAR-T細胞と同等であった。また、臍帯血移植後のドナー由来の末梢血由来GMR.CAR-T細胞は、自身のJMML CD34陽性細胞を殺傷した。興味深いことに、臍帯血由来の正常CD34陽性細胞や骨髄由来の正常CD34陽性細胞に対しては、GMR.CAR-T細胞は明らかな殺傷効果を示さなかった。GMCSFR.CAR-TはGM-CSFのopen reading frameから作製したため、GM-CSF刺激下においても殺傷効果を発揮するのかを検討した。その結果、SCF、TPO、IL-3刺激下と同等に、JMML患者のCD34陽性細胞に対して抑制効果を示した。AGM細胞上でSCFとTPOにより産生されるJMMLのday 7-CD34陽性細胞はNOGマウスに生着する白血病性幹細胞を含むため、培養開始後7日目にCD34陽性細胞やCD34陽性CD38陰性細胞数を算定し、白血病性幹細胞の増殖に対する抑制効果を検討した。その結果、GMR.CAR-T細胞は、7 monosomyやPTPN11変異を有するJMML患者のCD34陽性細胞やCD34陽性CD38陽性細胞だけではなく、CD34陽性CD38陰性細胞の増殖をも著明に抑制した。一方、臍帯血由来のCD34陽性細胞には明らかな影響を及ぼさなかった。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] In vitro expansion of CD34+CD38- cells under stimulation with hematopoietic growth factors on AGM-S3 cells in juvenile myelomonocytic leukemia.2015
Author(s)
Sakashita K, Kato I, Daifu T, Saida S, Hiramatsu H, Nishinaka Y, Ebihara Y, Ma F, Matsuda K, Saito S, Hirabayashi K, Kurata T, Uyen LT, Nakazawa Y, Tsuji K, Heike T, Nakahata T, Koike K.
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Journal Title
Leukemia
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Anti-leukemic potency of piggyBac-mediated CD19-specific T cells against refractory Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia.2014
Author(s)
Saito S, Nakazawa Y, Sueki A, Matsuda K, Tanaka M, Yanagisawa R, Maeda Y, Sato Y, Okabe S, Inukai T, Sugita K, Wilson MH, Rooney CM, Koike K.
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Journal Title
Cytotherapy
Volume: 16
Pages: 1257-69
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Myeloid progenitors with PTPN11 and non-RAS pathway gene mutations are refractory to treatment with 6-mercaptopurine in juvenile myelomonocytic leukemia.2014
Author(s)
Matsuda K, Nakazawa Y, Iwashita C, Kurata T, Hirabayashi K, Saito S, Tanaka M, Yoshikawa K, Yanagisawa R, Sakashita K, Sasaki S, Honda T, Koike K.
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Journal Title
Leukemia
Volume: 28
Pages: 1545-8
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Frequent coexistence of RAS mutations in RUNX1-mutated acute myeloid leukemia in Arab Asian children.2014
Author(s)
Al-Kzayer LF, Sakashita K, Al-Jadiry MF, Al-Hadad SA, Uyen LT, Liu T, Matsuda K, Abdulkadhim JM, Al-Shujairi TA, Matti ZI, Hasan JG, Al-Abdullah HM, Inoshita T, Kamata M, Sughayer MA, Madanat FF, Koike K.
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Journal Title
Pediatr Blood Cancer
Volume: 61
Pages: 1980-5
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Analysis of Class I and II Aberrations in Iraqi Childhood Acute Myeloid Leukemia Using Filter Paper Cards.2014
Author(s)
Al-Kzayer LF, Uyen LT, Al-Jadiry MF, Al-Hadad SA, Al-Badri SA, Ghali HH, Ameen NA, Liu T, Matsuda K, Abdulkadhim JM, Al-Shujairi TA, Matti ZI, Hasan JG, Al-Abdullah HM, Al-Ani MH, Saber PA, Khalil HM, Inoshita T, Kamata M, Koike K, Sakashita K.
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Journal Title
Ann Hematol
Volume: 93
Pages: 949-55
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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