2014 Fiscal Year Research-status Report
エストロゲン代謝に着目した食品因子のホルモン依存性がん予防効果に関する基礎的研究
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24501003
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| Research Institution | Aichi Gakusen University |
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Principal Investigator |
竹村 ひとみ 愛知学泉大学, 家政学部, 講師 (60295558)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
下位 香代子 静岡県立大学, 食品栄養科学部, 教授 (10162728)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ホルモン依存性疾患 / エストロゲン代謝 / がん化学予防 / 食品因子 / フラボノイド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
女性ホルモンであるエストロゲンの長期曝露は、乳がんをはじめとするホルモン依存性疾患のリスク要因の１つと言われている。乳がんの発生機序として、解毒代謝酵素シトクロムp450(CYP)1を介した17β-エストラジオール(E2)の代謝活性化によるカテコールエストロゲン(CE)およびそのキノン体(CE-Q)生成に伴うDNA付加体形成および酸化的DNA損傷が一因と考えられている。これまでに我々は、天然物由来のフラボノイド化合物がCYP1活性を選択的に阻害することを見出した。本研究では、DNA鎖切断の指標として、脱プリン部位(AP sites)の検出、単細胞ゲル電気泳動（コメットアッセイ）を用いて、ヒト乳がん細胞によるエストロゲンのDNA損傷ならびにフラボノイド化合物の1つクリソエリオールの効果について検討を行っている。
ヒト乳がん細胞MCF-7にE2またはCEを添加し一定時間保持した後、細胞を回収した。一方でクリソエリオールにて15分間前処理を行った後、同様の処理を行った。AP sitesの検出は、DNA Damage Quantification Kitを用いた。コメットアッセイは、回収した細胞をスライドグラス上でアガロースの薄層に封入し、溶解液ついでアルカリ溶液に浸漬した後、アルカリ条件下で電気泳動を行い、蛍光顕微鏡にて観察、DNA損傷の程度をComet Analyzerにて評価した。
CEの1つである4-OHE2の30μM、1時間処理でAP sitesの急激な増加が認められた。しかしE2の30μM処理では有意な変化は認められなかった。コメットアッセイにより、E2単独処理群では、無処理群と比較しDNA損傷の増加を認めた。一方、クリソエリオール単独処理では、DNA損傷の増加は認められなかったが、E2およびクリソエリオールの複合処理により、DNA損傷は大幅に低下した。
エストロゲンによるDNA損傷に対し、メトキシフラボノイドのクリソエリオールが抑制効果を有することが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本研究計画を実施するための実験設備・機器が多岐にわたることから、所属機関での実施は困難であり、共同研究機関の設備を利用し実験を実施しているため、当初の計画から遅れが生じている。
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| Strategy for Future Research Activity |
共同研究先との連携を強化し、本研究課題の実験を優先的に遂行するよう努める。また、所属機関および近隣研究機関にて実施可能な研究計画へ一部変更することも検討していく。
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| Causes of Carryover |
本研究を実施するための実験設備が多岐にわたり、研究代表者の所属機関にて実施することが困難なため、共同研究機関と連携し実施している。26年度は、主に前年度までに購入した機器、試薬で実験を実施したため、未使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度は、計画している実験を実施するため、新たに必要な機器、試薬、消耗品購入のため、未使用額はその経費に充てることとしたい。
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