2014 Fiscal Year Research-status Report
ＧＰＣＲシグナル複合体の細胞内配置に関する時空間制御機構の解明
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24590311
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
柳澤 輝行 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (90133941)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 岳哉 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (10312696)
助川 淳 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員教授 (30187687)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 受容体 / チャネル / 輸送系 / シグナル情報伝達 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度の検討においてGHRHがGHRH受容体に結合した際に、受容体のC末端4アミノ酸が欠損すると、受容体の細胞内への輸送系との相互作用が消失することを見出し、この輸送にPICK1が必須であることを、この研究で見出し報告している。本年度は、PICK1が内在化したAMPA受容体の細胞表面へのリサイクリング過程において、Endosomeの細胞内輸送を制御するという知見から、PICK1がAMPA受容体と同様にGHRH受容体の細胞表面へのリサイクリング過程において、Endosomeの細胞内輸送に関与することを確認するためにPICK1分子内に存在するPDZドメインあるいはBARドメインを欠損させた遺伝子を構築した。これまでの研究でPDZドメイン内の特定のアミノ酸残基に変異を導入した変異体を構築している。本年度は、BARドメイン内の特定のアミノ酸残基に変異を導入した変異体を複数構築した。これらの変異体遺伝子を発現ベクターに組み込み、CHO細胞に遺伝子導入を行い2日間培養した。
2日間培養した細胞から細胞抽出液を作成し、細胞内における導入遺伝子の発現をWestern blot法により確認を行った。導入した遺伝子すべての発現を確認することができた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の研究計画に従い、研究を遂行しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
GHRH刺激後に細胞内に惹起される細胞内情報伝達系はProtein Kinase Aであると考えられている。しかし、他の経路の関与も否定できないので、それについて検討を行い、GHRHR-PICK1複合体形成による細胞内情報伝達の統合について検討を加える予定。
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| Causes of Carryover |
本年度の研究計画遂行の際に可能な限り節約に努めた結果、88円という少額であるが予算の次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度の予算に組み入れ、研究計画を遂行するために、物品費として使用する。
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[Journal Article] Involvement of the histamine H1 receptor in the regulation of sympathetic nerve activity.2015
Author(s)
Murakami M1, Yoshikawa T2, Nakamura T2, Ohba T3, Matsuzaki Y4, Sawamura D4, Kuwasako K5, Yanagisawa T6, Ono K3, Nakaji S7, Yanai K2.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun.
Volume: 458
Pages: 584-589
DOI
Peer Reviewed
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