腸炎ビブリオの鉄獲得機構・シデロフォア受容体に対する研究

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24590529
• Research Institution: University of the Ryukyus
• Principal Investigator: 中尾 浩史 琉球大学, 医学部, 教授 (20237217)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 腸炎ビブリオ / シデロフォア

Outline of Annual Research Achievements

腸炎ビブリオは日本における主要な細菌性食中毒原因菌の一つである。魚介類を生食する食生活のある日本に特徴的な食中毒であったが、近年、食のグローバル化に伴い、様々な国での感染報告がなされている。また、養殖エビの大量死の原因菌としても報告されており、世界各地で腸炎ビブリオに対する迅速な検査法及び予防法が必要とされている。
腸炎ビブリオは、他の生物と同様にその生存・増殖に「鉄」を必要とする。しかし、環境中あるいは生体内において細菌が利用できる遊離鉄はごくわずかである。腸炎ビブリオは増殖が最も速い細菌の一つであり、その速い増殖を支えるために優れた鉄獲得機構を有している。この鉄獲得機構により、宿主体内においても増殖し病原性を示すことができる。申請者は腸炎ビブリオがビブリオフェリンという鉄と特異的に結合するキレーター（シデロフォア）を産生し、菌体外に分泌し、菌体外の鉄と結合して、「鉄-ビブリオフェリン複合体」を形成し、その複合体に対する特異的受容体を介して取り込む系があることを見出し、鉄制限に応じた発現制御が行われていることを明らかにしてきた。前年度までに、受容体に対する破壊株の作成を行い、2つの受容体が種々の培養条件において働きが異なること、ビブリオフェリン受容体抗PvuAモノクローナル抗体を作成し、この抗体のみでは増殖の抑制は弱いことが見出されている。今年度はもう一つの受容体PsuAに対するモノクローナル抗体を作成することを目的に大量産生株の作成を行った。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

今年度はPsuAモノクローナル抗体を作成する予定であったが、PsuA大量産生株の作成が遅れた。

Strategy for Future Research Activity

PsuA大量産生株の作成は終えたので、産生条件の至適化および大量調製を行った後にこれを抗原として抗PsuAモノクローナル抗体の作成を行う。

Causes of Carryover

申請者の研究室は申請者と助教の2人のみである。昨年度より助教が休職しており、研究室及び大学の業務を申請者1人のみで行うこととなったため研究の進行に遅れを生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

PsuA大量産生株の作成は終わっているので、産生条件、精製条件の至適化を行った後これを抗原としてモノクローナル抗原の作成を行う。