2013 Fiscal Year Annual Research Report
新規リソソーム指向性トラフィック制御化合物の探索と治療法開発への応用
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24659262
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
伊藤 孝司 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (00184656)
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| Keywords | ドラッグデリバリー / リソソーム病 / 酵素トラフィキング / 酵素補充療法 / iPS細胞 / 糖鎖レセプター / シグナル伝達 / 単球/マクロファージ |
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| Research Abstract |
リソソーム性β-ヘキソサミニダーゼA（HexA, αβヘテロ二量体）の遺伝的欠損により、GM2ガングリオシド（GM2）の脳内過剰蓄積を伴うTay-Sachs病（TSD）とSandhoff病（SD）モデル系を用い、リソソーム酵素のトラフィック異常と細胞外から補充した組換えHexのリソソームへの輸送促進技術の開発と評価を目的として研究を進めた。
H25年度は、GM2分解能とプロテアーゼ耐性を示す改良型HexB（ββホモ二量体）を高発現するCHO細胞株を樹立し、その培養上清からPhos-tagカラムを用いるマンノース-6-リン酸（M6P）含有糖鎖付加型酵素の精製法を確立した。また研究協力者の浦野・浅沼らが開発した酸性pH活性化プローブ（RhPM）と組換えHexとのコンジュゲートを作製し、患者由来線維芽細胞内への取り込みとリソソームへの輸送のイメージングに成功した。またカチオン非依存及び依存性M6Pレセプター（CI-及びCD-M6PR）を各々分泌するメタノール資化性酵母株の樹立と各ペプチド抗体の作製に成功し、両M6PRの細胞内局在性解析を可能にした。一方、HexA及びHexBの同時欠損を伴うSDマウスでは、発症後期に骨髄由来細胞が脳内に浸潤して神経炎症を惹起し、神経症状を悪化させると考えられている。本研究では、SDマウス骨髄由来単球系細胞を樹立し、野生型に比べ、同マウスの脳内で発現亢進するMacrophage inflammatory protein 1-α（Mip-1α）に対する感受性（そのレセプターCCR1の発現増大）、アクチン重合関連タンパク発現と浸潤能の増大、またPI3 kinase介在性シグナリングの関与を解明した。さらに組換えHexB補充により、蓄積GM2の減少とPI3K及びアクチン重合関連タンパクの発現等の正常化が示され、GM2の蓄積とPI3Kシグナリング経路の活性化との相関が示唆された。
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[Journal Article] Combination with a defucosylated anti-HM1.24 monoclonal antibody plus lenalidomide induces marked ADCC against myeloma cells and their progenitors.2013
Author(s)
Takeshi Harada, Shuji Ozaki, Asuka Oda, Daisuke Tsuji, Akishige Ikegame, Masami Iwasa, Kengo Udaka, Shiroh Fujii, Shingen Nakamura, Hirokazu Miki, Kumiko Kagawa, Yoshiaki Kuroda, Shigeto Kawai, Kouji Itou, Hisafumi Yamada-Okabe, Toshio Matsumoto and Masahiro Abe
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 26
Pages: No.8(12)
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Establishment of patient-derived iPS cells with neurodegenerative lysosomal storage diseases and application for evaluating lysosomal enzyme replacement effects on differentiated neural cells.
Author(s)
Kouji Itou, Daisuke Tsuji, Mariko Ikuo, Keisuke Kitakaze, So-ichirou Nishioka, Izumi Imataki, Saeka Yamaguchi, Yasunori Chiba, Hitoshi Sakuraba, Isao Kobayashi, Hideki Sezutsu and Hiroaki Machii
Organizer
The IUBMB 10th International Symposium on Cell Surface Macromolecules
Place of Presentation
Saha Institute of Nuclear Physics,Kolkata(India)
Invited
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[Presentation] Molecular properties of recombinant human lysosomal enzyme produced by transgenic silkworm and therapeutic potential for lysosomal storage disease.
Author(s)
Kouji Itou, Daisuke Tsuji, So-ichirou Nishioka, Syunsuke Ikedo, Tetuya Higashi, I Kobayashi, H Sezutsu, A Ishii, K. Harazono, M. Tada, Nana Kawasaki and Hiroaki Machii
Organizer
Gordon Research Conference 2013 Lysosomal Diseases
Place of Presentation
Renaissance Tuscany Il Ciocco Resort ,Lucca(Italy)
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[Presentation] リソソーム病治療薬候補としてのトランスジェニックカイコ絹糸腺由来組換えヒトカテプシンAの機能解析と分子装飾
Author(s)
西岡 宗一郎, 小林 功, 辻 大輔, 池戸 駿介, Md.RAHMAN Motiur, 東 哲也, 真板 宣夫, 瀬筒 秀樹, 町井 博明, 原園 景, 石井 明子, 川崎 ナナ, 伊藤 孝司
Organizer
第4回グライコバイオロジクス研究会プログラム
Place of Presentation
札幌市民ホール（北海道）
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[Presentation] 新規機能性RNA psm-mecはagrA遺伝子の翻訳を抑制してメチシリン耐性黄色ブドウ球菌の病原性を抑制する
Author(s)
幾尾 真理子, 齋藤 裕樹, 大前 陽輔, 毛 瀚, 長野 源太郎, 藤幸 知子, 沼田 俊介, 韓 笑, 小幡 佳津明, 長谷川 節雄, 山口 博樹, 猪口 孝一, 伊藤 輝代, 平松 啓一, 伊藤 孝司, 関水 和久, 垣内 力
Organizer
第86回日本生化学会大会
Place of Presentation
パシフィコ横浜（神奈川県）
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[Presentation] ガラクシアリドーシス治療薬候補としてのトランスジェニックカイコ由来ヒトカテプシンAの解析
Author(s)
西岡 宗一郎, 小林 功, 辻 大輔, 池戸 駿介, Md.RAHMAN Motiur, 東 哲也, 真板 宣夫, 瀬筒 秀樹, 町井 博明, 原園 景, 石井 明子, 川崎 ナナ, 伊藤 孝司
Organizer
第86回日本生化学会大会
Place of Presentation
パシフィコ横浜（神奈川県）
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[Presentation] バイオ医薬品の生産基材としてのトランスジェニックカイコとネオグライコバイオロジクス創製への応用
Author(s)
伊藤 孝司, 小林 巧, 西岡 宗一郎, 原園 景, 久保 勇樹, 真板 宣夫, 辻 大輔, Md Motiiur RAHMAN, 池戸 駿介, 石井 明子, 川崎 ナナ, 町井 博明, 瀬筒 秀樹
Organizer
第32回日本糖質学会大会
Place of Presentation
大阪国際交流センター （大阪府）
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[Presentation] ガラクシアリドーシス治療薬候補としてのトランスジェニックカイコ由来ヒトカテプシンAの解析
Author(s)
西岡 宗一郎, 小林 功, 辻 大輔, 池戸 駿介, Md.RAHMAN Motiur, 東 哲也, 真板 宣夫, 瀬筒 秀樹, 町井 博明, 原園 景, 石井 明子, 川崎 ナナ, 伊藤 孝司
Organizer
第54回日本生化学会中国・四国支部例会
Place of Presentation
徳島大学（徳島県）
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