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2016 Fiscal Year Annual Research Report

Structural and functional analysis of CENP-TWSX complex

Research Project

Project/Area Number 25291018
Research InstitutionTokyo University of Science

Principal Investigator

西野 達哉  東京理科大学, 基礎工学部, 准教授 (50533155)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2017-03-31
Keywords染色体分配 / タンパク質複合体 / 生化学 / 構造生物学
Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は真核生物の染色体分配に関わるCENP-TWSX複合体の構造と機能の解析を通じて染色体分配機構解明を目指すものである。CENP-TWSX複合体は染色体セントロメア領域にてヌクレオソーム様構造を形成し、キネトコア複合体の足場を形成するのに重要な複合体であるがそのDNA認識機構は未だ不明である。これまでの解析よりCENP-TWSX複合体の立体構造はヒストンと類似しているものの、その結合の様式は異なっていることが明らかになっている。特にCENP-TWSX複合体がDNAに結合するとDNAに正の超らせんを誘導することが知られているが、その機構については依然として不明である。本年度はこの機構を明らかにする目的で昨年に引き続きCENP-TWSX複合体のDNAとの複合体について生化学及び結晶構造解析を行った。昨年までにCENP-SX/DNA複合体の結晶化を報告したが、今年度はこの結晶の立体構造を明らかにする目的でBr-Uridineを含む二重鎖DNAやセレノメチオニンに置換したCENP-SX複合体を作成した。これらの重原子導入置換体を使ってCENP-SX複合体とDNAの結晶を作成し、PF及びSPring8放射光施設にてX線を照射した。その結果、これらの結晶より得られる回折は非常に弱く、立体構造決定に必要な位相情報を得ることができなかった。今後はさらなる改善を行い、立体構造を決定を目指す。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (9 results)

All 2017 2016

All Journal Article (1 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results) Presentation (8 results)

  • [Journal Article] Biochemical and structural analysis of kinetochore histone-fold complexes2016

    • Author(s)
      Tatsuya Nishino, Tatsuo Fukagawa
    • Journal Title

      Methods in Molecular Biology

      Volume: 1413 Pages: 135 146

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3542-0_9

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] 好熱性真核生物の朝明2017

    • Author(s)
      西野 達哉
    • Organizer
      第5回蛋白質相互作用研究会
    • Place of Presentation
      静岡県御殿場市・時之栖ホテルBrush-up
    • Year and Date
      2017-03-28 – 2017-03-30
  • [Presentation] 好熱性真菌由来FANCM組み換えタンパク質の発現精製過程における最適条件探索2017

    • Author(s)
      小野村 章伍、西野 達哉
    • Organizer
      第5回蛋白質相互作用研究会
    • Place of Presentation
      静岡県御殿場市・時之栖ホテルBrush-up
    • Year and Date
      2017-03-28 – 2017-03-30
  • [Presentation] タンパク質-DNA複合体の結晶化とクライオ条件2017

    • Author(s)
      伊藤 翔、西野 達哉
    • Organizer
      第5回蛋白質相互作用研究会
    • Place of Presentation
      静岡県御殿場市・時之栖ホテルBrush-up
    • Year and Date
      2017-03-28 – 2017-03-30
  • [Presentation] 切っても切れないSeparaseと〇〇の関係2017

    • Author(s)
      池田聡人、西野達哉
    • Organizer
      第5回蛋白質相互作用研究会
    • Place of Presentation
      静岡県御殿場市・時之栖ホテルBrush-up
    • Year and Date
      2017-03-28 – 2017-03-30
  • [Presentation] 好熱性真菌 Chaetomium thermophilum を用いた染色体分配を促進する Separase の構造解析2017

    • Author(s)
      池田 聡人、西野 達哉
    • Organizer
      2016年度量子ビームサイエンスフェスタ
    • Place of Presentation
      茨城県つくば市、つくば国際会議場
    • Year and Date
      2017-03-14 – 2017-03-15
  • [Presentation] ニワトリ由来のFANCM-CENP-SXのX線結晶構造解析2017

    • Author(s)
      伊藤 翔、西野 達哉
    • Organizer
      2016年度量子ビームサイエンスフェスタ
    • Place of Presentation
      茨城県つくば市、つくば国際会議場
    • Year and Date
      2017-03-14 – 2017-03-15
  • [Presentation] ヒトHP1の構造機能解析2017

    • Author(s)
      佐久間 佳織、迫 洸佑、広田 亨、西野 達哉
    • Organizer
      2016年度量子ビームサイエンスフェスタ
    • Place of Presentation
      茨城県つくば市、つくば国際会議場
    • Year and Date
      2017-03-14 – 2017-03-15
  • [Presentation] 好熱性真菌HP1タンパク質の構造機能解析2017

    • Author(s)
      杉田 紗織、西野 達哉
    • Organizer
      2016年度量子ビームサイエンスフェスタ
    • Place of Presentation
      茨城県つくば市、つくば国際会議場
    • Year and Date
      2017-03-14 – 2017-03-15

URL: 

Published: 2018-01-16  

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