2016 Fiscal Year Annual Research Report
The tooth-format cellular differentiating regulation from iPSCs
| Project/Area Number |
25293418
|
|---|
| Research Institution | Niigata University |
|---|
Principal Investigator |
齊藤 一誠 新潟大学, 医歯学系, 准教授 (90404540)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山崎 要一 鹿児島大学, 歯学部, 教授 (30200645)
佐藤 正宏 鹿児島大学, 医療ミニブタ先端医療開発研究センター, 教授 (30287099)
齊藤 陽子 新潟大学, 医歯学系, 助教 (30404487)
稲田 絵美 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 助教 (30448568)
松山 清 久留米工業高等専門学校, 生物応用化学科, 准教授 (40299540)
野口 洋文 琉球大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50378733)
大島 勇人 新潟大学, 医歯学系, 教授 (70251824)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | 再生歯学 / 小児歯科学 / iPS細胞 / 歯髄幹細胞 / 乳歯 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
歯科臨床において、上下顎20本ある乳歯は交換に伴い脱落し、子どもの記念に保存する以外はほとんどが廃棄されている。しかし、バイオリサイクルの観点から、乳歯は歯髄幹細胞の有効な細胞供給元として注目されている。
Lymphoid enhancer factor-1(LEF1)は、48-kDの核タンパク質であり、Wnt/β-cateninシグナルにおける転写因子として知られる。また、LEF1は、未分化な胚性幹細胞（ES細胞）における未分化の維持・増殖に関与することが報告されており、本研究では、iPS細胞から遺伝子工学的手法を用いてLEF1陽性細胞を単離することで、幹細胞レベルでの分化誘導制御を目的とした。乳歯歯髄細胞に山中４因子を導入後、乳歯由来iPS細胞を樹立し、以下の結果を得た。１）乳歯歯髄細胞由来iPS細胞を安定的に樹立することが可能となった。２）樹立したiPS細胞への遺伝子導入が可能かどうかの検討を行い、piggyBac transposonシステムの応用により、ゲノムへの挿入による安定発現株の樹立が可能であった。３）ヒトLEF1プロモーターを用いた遺伝子工学的手法により、初代培養細胞からLEF1陽性細胞の単離が可能となった。４）このLEF1陽性細胞について、歯髄幹細胞マーカーであるSTRO-1、CD44およびSSEA-4は免疫染色陽性で、かつ、RT-PCR法にて、いずれの細胞株においてもOCT3/4、SOX2、NANOGおよびREX1が検出され、LEF1陽性細胞が幹細胞特性を有することが明らかとなった。５）乳歯歯髄細胞由来iPS細胞へヒトLEF1プロモーターを配したプラスミドベクターを遺伝子導入後、分化誘導を行ったところ、LEF1陽性の歯髄幹細胞様の細胞を得ることができた。これらの細胞は、乳歯歯髄幹細胞であるSHEDと同様の遺伝子発現を有していた。
|
| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Causes of Carryover |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
|
-
[Journal Article] Isolation and characterization of lymphoid enhancer factor-1-positive deciduous dental pulp stem-like cells after transfection with a piggyBac vector containing LEF1 promoter-driven selection markers2017
Author(s)
Tomoya Murakami, Issei Saitoh, Masahiro Sato, Emi Inada, Miki Soda, Masataka Oda, Hisanori Domone, Yoko Iwase, Tadashi Sawami, Kazunari Matsueda, Yutaka Terao, Hayato Ohshima, Hirofumi Noguchi, Haruaki Hayasaki
-
Journal Title
Archives of Oral Biology
Volume: 印刷中
Pages: -
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
-
-
-
