2015 Fiscal Year Annual Research Report
選択的分離手法を駆使した抗体医薬の体内動態解析法の開発と臨床分析への展開
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25460040
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| Research Institution | University of Shizuoka |
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Principal Investigator |
轟木 堅一郎 静岡県立大学, 薬学部, 准教授 (70341451)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 秀樹 岐阜薬科大学, 薬学部, 准教授 (00419665)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 抗体医薬 / HPLC分析 / 血中薬物濃度分析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年，抗体医薬の使用が進むにつれ，臨床現場における有効治療域濃度の維持や投与計画の設定，適正使用などのための血中薬物濃度分析の必要性が高まっている。現在，抗体医薬の血中薬物濃度分析には，主にELISA法が用いられている。ELISAは高感度かつハイスループットな分析を可能とするが，交叉反応の可能性や分析精度に問題がある場合も多い。そのため，ELISAの測定結果を補完する特異性かつ信頼性の高い分析法の開発が望まれている。そこで昨年度我々は，アフィニティー精製と高温逆相LC（HT-RPLC）-蛍光検出を組み合わせた抗体医薬の新規血漿薬物濃度分析法を開発した。本年度は、本分析法をBevacizumabおよびInfliximabが投与されたガン患者，関節リウマチ患者の実試料分析へと適用することができた。
本分析法は臨床分析に十分な感度を有していたが，微量血液試料での分析や，低用量投与が予想される次世代型抗体医薬の分析に適用するには，更なる高感度検出化が要求される。そこで次に，上記分析法における検出感度の向上に関する検討を行った。具体的には，(1) o-phthalaldehyde（OPA）と2-mercaptoethanolによるポストカラム蛍光誘導体化，(2) ヒトIgGのFc部位と特異的に結合するZenon Human IgG labeling kitによる蛍光標識法について検討した。その結果，(1)ではポストカラム誘導体化条件の最適化により，HT-RPLC分析において自然蛍光よりも2倍以上の高感度化を達成した。(2)では，SEC分析において抗体医薬との蛍光性複合体の生成が確認され，自然蛍光検出よりも10倍以上の高感度化を達成した。以上，本研究により簡便かつ高感度，高精度な血中抗体医薬分析法を確立することができた。本法はELISA法やトリプシン消化-LC-MS/MS法に代替しうるポテンシャルを秘めており，製薬現場，臨床現場等での利用が期待できる。
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[Journal Article] Bioanalysis of bevacizumab and infliximab by high-temperature reversed-phase liquid chromatography with fluorescence detection after immunoaffinity magnetic purification2016
Author(s)
K. Todoroki, T. Nakano, Y. Eda, K. Ohyama, H. Hayashi , D. Tsuji, J.Z. Min, K. Inoue, N. Iwamoto, A. Kawakami, Y. Ueki, K. Itoh, T. Toyo'oka
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Journal Title
Anal. Chim. Acta
Volume: 916
Pages: 112-119
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] An easy-to-use excimer fluorescence derivatization reagent, 2-chloro-4-methoxy-6-(4-(pyren-4-yl)butoxy)-1,3,5-triazine, for use in the highly sensitive and selective liquid chromatography analysis of histamine in Japanese soy sauces2015
Author(s)
T. Nakano, K. Todoroki, Y. Ishii, C. Miyauchi, A. Palee, J.Z. Min, K. Inoue, K. Suzuki, T. Toyo’oka
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Journal Title
Anal. Chim. Acta
Volume: 880
Pages: 145-151
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Towards the chiral metabolomics: Liquid chromatography-mass spectrometry based DL-amino acid analysis after labeling with a new chiral reagent, (S)-2,5-dioxopyrrolidin-1-yl-1-(4,6-dimethoxy-1,3,5- triazin-2-yl)pyrrolidine-2-carboxylate, and the application to saliva of healthy volunteers2015
Author(s)
T. Mochizuki, T. Takayama, K. Todoroki, K. Inoue, J.Z.Min, T. Toyo'oka
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Journal Title
Anal. Chim. Acta
Volume: 875
Pages: 73-82
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Human nails metabolite analysis: A rapid and simple method for quantification of uric acid in human fingernail by high-performance liquid chromatography with UV-detection2015
Author(s)
5.Xi-L. Li, G. Li, Y.-Z. Jiang, D. Kang, C. H. Jin, Q. Shi, T. Jin, K. Inoue, K. Todoroki, T. Toyo'oka, J.Z. Min
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Journal Title
J. Chromatogr. B
Volume: 1002
Pages: 394-398
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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